RNA 干扰及其在动物传染病方面的研究概况
2012-03-30杨亮宇孙永科杨玉艾王玉娥孔令富
杨亮宇,孙永科,,杨玉艾,王 凯,王玉娥,孔令富*
(1.云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001)
RNA干扰是指生物体在进化过程中,由高度保守的双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱导同源mRNA高效特异性降解的现象。它是生物体抵御外来感染的一种重要保护机制。RNAi作为沉默特定基因功能的新技术,为基因功能的研究提供了一个高效、简便的方法,在功能基因组学领域掀起一场革命。Science杂志在2001年将RNAi列为10大科学成就之一,2002年又将其列为当年10大科学成就之首,Nature杂志也将其评为2002年重大科技成果之一。2006年度诺贝尔生理学或医学奖奖授予两名美国科学家安德鲁-费里和克拉格-米洛,以表彰他们在RNA干扰现象发现过程中的贡献。
1 RNAi的发现
目前,有效抑制基因表达的方法主要有基因敲除(knock out)、基因表达降低(knock down)、显性阴性(dominant negative)、反义RNA(ant is en se RNA)等方法。这些方法均存在操作复杂,基因的选择局限性大且结果不稳定,无法预知试验效果等局限性。因此科学家们试图寻找更有效、易操作、结果更稳定的技术方法。
1990年Orgenson等试图将一个能产生色素的基因置于一个强启动子后导入矮牵牛中,来增加花瓣的着色。然而却出现了完全相反的结果,一些转基因的花出现了全白或部分白色。这就提示,不仅导入的基因未被表达,反而连植物本身的某些合成色素的基因也失活,即出现了一种共抑制(cosuppression)现象[1]。1995年Guo和Kem Phues发现注射正义RNA和反义RNA均能有效并特异性地抑制秀丽新小杆线虫par-1基因的表达,该结果不能使用反义RNA技术的理论做出合理解释。……
