梁祥森，陈铭伍，冼 磊

(广西医科大学第一附属医院，南宁530021)

MTA1基因是肿瘤转移相关蛋白家族(MTA)的成员之一，通过调控一系列与浸润转移有关的蛋白，在癌细胞侵袭和转移过程中发挥重要作用，而E-钙黏蛋白(E-cadherin)为钙依赖性黏附蛋白家族中的重要成员之一，是与浸润转移有关的蛋白之一，它在上皮性恶性肿瘤中最重要的生理功能就是抑制肿瘤细胞脱落后发生转移，其表达的缺失或减低可能与人癌细胞的去分化、侵袭性和转移倾向有关。MTA1有可能通过对E-cadherin的调节，从而在癌细胞的侵袭和转移过程中发挥作用。本研究采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)联合检测40例非小细胞肺癌(NSCLC)组织、12例癌旁组织、12例良性病变肺组织中MTA1和E-cadherin基因表达的相对水平，分析其表达与临床和组织病理学特征的关系，探讨MTA1和E-cadherin在NSCLC中对肿瘤的发生、侵润、转移方面作用的可能机制，分析二者的关系，寻求一种新而有效的检测方法来提高肺癌的早期检出率，提高患者生存率。

1 材料与方法

1.1 材料 取我院2010年7月～2011年1月手术切除的NSCLC标本40例，所有病例术前未行放疗和化疗;另取其中12例癌旁组织、12例手术切除的良性病变肺组织(6例肺大疱、3例肺结核、3例炎性包块)作为对照，全部标本收集后立即于－80℃冰箱保存，全部标本均经病理确诊。逆转录试剂盒购自Fermentas公司，SYBR Green I荧光染料购自北京天根公司。荧光定量PCR仪为Step one V2.1(ABI公司)。引物由大连宝生物公司设计合成。MTA1(84 bp)F:5'-CAGCTACGAGCAGCACAACG-3';R:5'-TGTCCGTGGTTTGCCAGA-3'。E-cadherin(123 bp)F:5'-AAGTGCTGCAGCCAAAGACAGA-3';R:5'-AGGTAGACCCACCTCAATCATCCTC-3'。内参β-actin(116 bp)F: 5'-GTGACGTTGACATCCGTAAAGACC-3';R:5'-GCTAGGAGCCAGGCAGTAATCT-3'。

1.2 方法

1.2.1 提取总RNA 按TRIzol裂解抽提法进行总RNA的提取。通过测 A260值检测 RNA浓度，测A260/A280值检测其纯度。……