申 申

辽宁医学院附属第二医院，辽宁锦州 121000

临床和基础研究均表明生长抑素类似物奥曲肽（OTC）不仅能抑制多种内分泌激素分泌，而且对多种肿瘤生长也具有抑制作用，可作为联合用药方案的基础。 多西他赛(DOC)为紫杉醇类抗肿瘤药物，单药或联合其它化疗药在进展期胃癌的治疗中已显示了较明显的优势。 现应用奥曲肽联合多西他赛干预胃癌细胞生长，验证奥曲肽对多西他赛是否有增敏作用。

1 材料与方法

1.1 材料与实验试剂

SGC-7901，多西他赛(20 mg，0.5 mL )，生长抑素类似物奥曲肽，胎牛血清，RPMI.1640 干粉培养基，胰酶，四甲基偶氮唑盐(MTT)，二甲基亚砜(DMSO)，碘化丙啶（PI），33258 荧光染料。

1.2 试验方法

1.2.1 奥曲肽、 多西他赛及联合用药对胃癌细胞增殖的影响 该实验设计奥曲肽药物分组浓度为1、5、20 ng/ mL; 多西他赛浓度为1、5、10、20、40 ug/mL。 取对数生长期的人胃癌SGC-7901 细胞，胰酶消化，制成细胞悬液，调整细胞浓度为5×104/ mL，每孔种200 uL 细胞悬液于96 孔培养板内，同时设立细胞对照组、奥曲肽处理组（1、5、20ng/mL）、多西他赛处理组（1、5、10、20、40 μg/mL）、联合用药组（奥曲肽+多西他赛1ng/mL+1μg/mL、1 g/mL+5 μg/mL、1 ng/mL+10 μg/mL、1 ng/mL+20 μg/mL、1ng/mL+40 μg/mL、5 ng/mL+1μg/mL、5 ng/mL+5 μg/mL、5 ng/mL+10 μg/mL、5 ng/mL+20 μg/mL、5 ng/mL+40 μg/mL 、20 ng/mL+1 μg/mL、20 ng/mL+5 μg/mL、20 ng/mL+10 ng/mL、20 ng/mL+20 μg/mL、20 ng/mL+40 μg/mL）每组设8 个复孔。置37℃、5%CO2饱和湿度孵箱内培养。于48 h 后取出96 孔板，2000 rpm 离心10 min， 超净工作台无菌条件下弃去上清，加200 uL/孔RPMI.1640 培养液及20 ul/孔MTT(5 mg/ml)，继续培养4 h， 取出后2000 rpm 离心10 min， 弃去上清液， 加150 uL/孔DMSO 震荡10 min 混匀，待溶解完全后酶标仪比色，波长570 nm。计算各组浓度抑制率。

1.2.2 流式细胞术分析细胞周期 根据MTT 比色法分析实验结果取抑制率最高浓度组，设立不加药对照组、奥曲肽20 ng/mL组、多西他赛40 μg/mL 组、联合用药奥曲肽20 ng/mL+多西他赛40 μg/mL 组，以胰蛋白酶消化对数生长期……