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改良抗酸染色法的经验交流

2012-01-28庞霞尹玉慧宋一民赵华莹陈月高冬玲

中国药物经济学 2012年3期

庞霞 尹玉慧 宋一民 赵华莹 陈月 高冬玲

抗酸杆菌(acid fast bacili)体内含有脂质、蛋白质和多糖类,由糖脂形成一个蜡质的外壳,它有特殊功用,如对一般染料不宜着色,但能与苯酚碱性复红结合成复合物,这种复合物能抵抗酸溶液的脱色作用,所以成为抗酸杆菌[1]。实验室常用Ziehl-Neelsen方法,但存在一些弊端,故作者尝试对该方法进行改良,效果显著,现介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料

来自郑州大学第一附属医院每天送验的新鲜手术标本。

1.2 溶液配制

①10%高碘酸水溶液:高碘酸10g,蒸馏水加至100ml。配制后置4~8℃冰箱保存,可用半年;②碱性复红酒精溶液:碱性复红 1g,用无水酒精 10ml配制。③5%苯酚水溶液:苯酚 5ml、蒸馏水加至100ml。④苯酚碱性复红溶液:碱性复红酒精溶液10ml和5%苯酚水溶液90ml混合,用前过滤。⑤20%硫酸水溶液

1.3 方法

①组织常规脱水包埋,切片厚度4~6μm待用。②将切片用等量的汽油和松节油混合液脱蜡三次,每次10min。③不用梯度酒精处理,只用吸水纸吸干油液。④水洗 5min。⑤10%高碘酸水溶液室温氧化20 min后充分水洗。⑥滴加苯酚碱性复红溶液在75℃的烤片机上染20min后水洗。⑦用20%硫酸水溶液分化至适当为止,充分水洗。⑧吸干水分,入烤箱烘干、封固。

2 结果

抗酸杆菌经染色后呈鲜红色,背景干净,有利于提高诊断率,并且可以长期保存。

3 讨论

目前结核病的发病率呈逐渐上升趋势水平,抗酸染色是检测结核病重要病理诊断之一,由于染色试剂和染色技术是影响抗酸染色质量的重要因素,根据多年的经验浅谈如下:①适当增加切片的厚度,4~6μm 最为适宜,可以提高检出率。……

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