地黄低聚糖对体外培养的小型猪脂肪组织来源干细胞增殖的影响
2012-01-26裴志勇赵玉生高伟尹巧香
裴志勇,赵玉生,高伟,尹巧香
(1.北京军区总医院干部病房一科,北京100700;2.解放军总医院老年心血管病研究所;3.空军总医院干部病房心内科)
地黄是一味重要的滋阴补肾中药,大量临床和实验研究证实其在免疫、血液及造血、内分泌、心血管、神经系统等方面具有广泛的药理活性。地黄低聚糖(RGOs)系从地黄中提取的低分子量多糖成分,体外研究表明,RGOs具有促进动物骨髓干细胞、骨骼肌成肌细胞增殖、分化的功能[1-3]。脂肪组织来源干细胞(ASCs)是近10年发现并引起学者们广泛关注的一种成体干细胞,多项研究表明,ASCs体外可分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、内皮细胞、神经细胞、平滑肌细胞和肝细胞[4-6]。而关于RGOs与ASCs的研究较少,本文旨在观察不同浓度RGOs对体外培养的小型猪ASCs增殖的影响,为中药用于干细胞移植提供新思路。
1 材料与方法
1.1 材料 广西巴马小香猪,雌雄不拘,体质量20~30 kg,由解放军总医院实验动物中心提供,许可证号:SYXK(军)2007-009。RGOs以生地黄为原料加工后经军事医学科学院毒物药物研究所提纯,高效液相色谱法检测RGOs提纯物中水苏糖含量为31.15%。L-DMED培养基、特级胎牛血清(FBS)、Ⅳ型胶原酶、胰蛋白酶均购自Gibco公司,DispaseⅡ中性蛋白酶购自Sigma公司,小鼠抗CD31单克隆抗体、小鼠抗CD90单克隆抗体均购自BD PharmingenTM公司,小鼠抗 CD29单克隆抗体、大鼠抗CD44单克隆抗体、小鼠抗CD45单克隆抗体、小鼠抗CD105单克隆抗体、小鼠抗HLA-DR单克隆抗体均购自Abcam公司,大鼠抗CD34单克隆抗体购自Santa cruz公司,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)购自江苏碧云天生物技术研究所。……
