银晓端， 曾 丽， 周建波

多发性硬化(multiple sclerosis，MS)是一种累及中枢神经系统白质并且以炎性脱髓鞘为特征的自身免疫性疾病，本病病因至今尚未完全清楚，炎症通常被认为在自身免疫性疾病的发病过程中起了至关重要的作用。因此，对炎症的相关研究是探索MS发病机制中的重要方面。近年来发现，许多感染性疾病和自身免疫疾病的发生与NLRP3炎性小体介导的炎症反应关系密切［1］，但目前为止，国内尚未见NLRP3炎性小体与MS或EAE关系的研究报道。本实验拟从NLRP3炎性小体入手，通过对MS的经典动物模型实验性自身免疫性脊髓炎大鼠(EAE)的研究，探索其是否参与MS炎性反应的发生，以及其上下游参与炎性反应发生的靶分子caspase-1、IL-1β细胞因子的表达情况。阐明NLRP3炎性小体信号通路在MS炎症反应中的作用机制，将可能为MS的诊断和治疗提供新的思路。

1 材料和方法

1．1 实验动物和分组 选取10只健康豚鼠，体重300～400g，雌雄不限，用于制备抗原。健康纯种远交雌性Wistar大鼠30只，体重180～220g，8～10周龄。将大鼠随机分为两组，分别为正常对照组10只、EAE模型组20只。以上动物均由广西医科大学动物中心提供。

1．2 EAE模型制备 用10%水合氯醛按0．5 ml/100g将豚鼠麻醉后断头处死，在冰上迅速解剖分离出脊髓，并去除脊髓表面的脊膜，再称重，加入等量4℃的0．9%生理盐水，匀浆后制成50%的脊髓匀浆液(GPSCH)，再加入等量的含6mg/ml卡介苗的完全弗式佐剂(CFA，Sigma公司)，混匀后用玻璃注射器抽打制成油包水型乳剂抗原GPSCH-CFA。

1．3 动物免疫和干预 将大鼠用10%水合氯醛按0．5ml/100g麻醉，模型组每只大鼠分别给予0．5ml的GPSCH-CFA，于双后足垫真皮下和颈部皮下3点进行皮下注射;对照组在相同部位注射0．5ml的CFA混合剂(完全弗氏佐剂和生理盐水按1∶1等体积混合，不含GPSCH)。……