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MLVA方法在军团菌分子分型中的应用评价*

2012-01-24朱兵清任红宇周海健邵祝军

中国人兽共患病学报 2012年3期
关键词:方法

朱兵清,任红宇,周海健,关 红,邵祝军

MLVA方法在军团菌分子分型中的应用评价*

朱兵清,任红宇,周海健,关 红,邵祝军

目的探讨MLVA方法在军团菌分型中的可应用性。方法选用文献报道的9个军团菌VNTR位点,对我国环境水中分离的81株Lp1型军团菌菌株和2株参考菌株进行分子分型研究,并与PFGE和SBT分型结果进行了比较。结果81株分离菌株9个VNTR位点的等位基因型别数分别为6,3,4,2,3,3,2,4和7,其中部分菌株的某些位点无扩增产物或产物为非目的片断。7个位点PCR产物具有重复单元;Lpms3位点PCR产物无重复单元;Lpms31位点部分菌株PCR产物有重复单元,另一些菌株无重复单元。对于具有重复单元的序列,不同菌株间以及同一菌株内各重复单元的序列变异均较大,3个位点存在不完整的重复单元。根据8个位点的PCR产物电泳结果,81株Lp1型分离菌株分为19个MLVA型。通过PFGE和SBT方法,81株Lp1型分离菌株分别分为46种PFGE带型和21种ST型。结论MLVA方法的分型能力不及PFGE方法,而与SBT方法分型能力相当。但是,MLVA方法操作简单、成本低廉,而且可对培养阴性的标本进行分型,因此,该方法适合在基层推广应用。

军团菌;嗜肺军团菌;分子分型;MLVA

军团病主要是由嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,Lp)感染引起的以肺部感染为主的疾病,其中,嗜肺军团菌中血清1型菌株(Lp1)引起的病例约占到80%左右[1]。已见报道的军团病暴发大多与环境水的军团菌污染关系密切[2]。因此,当军团病暴发以后快速确定污染的水源,对于控制疾病的蔓延具有非常重要的意义。然而,军团菌广泛存在……

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