51例新生儿脐带血单纯疱疹病毒的检测

2012-01-23任鹏姚娟金艳李法锦汪晓婷葛俊江龙凤赵蕾吉阳王明丽

微生物与感染 2012年2期

任鹏，姚娟，金艳，李法锦，汪晓婷，葛俊，江龙凤，赵蕾，吉阳，王明丽

1. 安徽医科大学微生物学教研室，合肥 230032； 2. 合肥市妇幼保健院，合肥 230001

单纯疱疹病毒(herpes simplex virus，HSV)属α疱疹病毒，直径110～120 nm，基因组为双链DNA，约150 kb。根据血清型，分为HSV-1和HSV-2，两者均可引起新生儿感染。孕早期感染HSV者因胚芽受破坏而流产；妊娠中、晚期感染者虽少发畸胎，但可引起胎儿和新生儿发病。孕期2种感染形式均可影响胎儿，特别是孕早期和分娩时首次感染可通过胎盘传播给胎儿。妊娠前20周首次感染可导致自然流产、死产和胎儿先天性畸形，特别是小头畸形、脑积水；妊娠中、晚期首次感染主要导致胎儿宫内发育迟缓[1]。因此，了解新生儿HSV感染情况，对指导新生儿HSV感染所致疾病的预防和治疗具有重要意义。本研究采集了合肥地区51例新生儿脐带血，通过套式聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)检测特异性HSV-1 gD基因和HSV-2 gG基因。PCR阳性扩增产物经测序后，通过美国国立生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information，NCBI)在线工具BLAST进行序列比对，确认HSV-1、HSV-2阳性标本，分析51例新生儿脐带血HSV感染情况。

1 材料和方法

1.1 研究对象

2010年11月～2011年6月，于某地妇幼保健院采集健康产妇顺产新生儿抗凝脐带血51份。

1.2 病毒株

HSV-1(F株)、HSV-2(Sav株)标准株[2]均为本室保存，用作阳性对照。

1.3 仪器和试剂

全血DNA抽提试剂盒购自北京索莱宝公司；DNA IQTMSystem-Small Sample Casework Protocol试剂盒购自Promega公司；试剂购自TaKaRa公司；梯度PCR仪为Biometra 公司产品。应用Gel Documentation System (Biosens SC 720)凝胶成像系统观察记录结果。引物合成和DNA测序均由上海Invitrogen公司完成。