卢 燕 何绮霞 蔡树云 姚业兴 徐军发 张良清 (广东医学院附属医院麻醉科，湛江524001)

髓样细胞触发受体-1(Triggering receptor expressed on myeloid cells-1，TREM-1)是在髓样细胞上表达的免疫球蛋白家族成员［1］，是一种在炎症反应的触发及放大过程中具有重要作用的蛋白，选择表达于髓样细胞(如单核/巨噬细胞、中性粒细胞)表面，可放大促炎性细胞因子的释放。TREM受体家族现已确认的成员有6个，其中TREM-1是该受体家族最具特征性的一员。TREM-1的基因位于人类6号染色体(6p 21.1)与 MHC区域相邻［2］，其相对分子质量约为26×103，含234个氨基酸，氨基酸序列开始于一个疏水性的信号缩氨酸，胞外区由一个单独的免疫球蛋白V区结构域构成，约194个氨基酸，跨膜区包括一个带正电的赖氨酸残基，有29个氨基酸，胞质区仅由几个氨基酸组成。TREM-1结合糖基后分子量为30 kD，未结合糖基为26 kD，感染早期还可以可溶性形式sTREM-1释放进入体液，而且sTREM-1与感染严重程度有较好的相关性，提示sTREM-1是一种早期诊断感染的新指标，为了进一步研究TREM-1在急性肺部感染发生发展中的作用，本研究建立了一种检测 sTREM-1的 ELISA方法。

1 材料与方法

1.1材料 酶联微量反应板，来源于cloning公司。鼠抗人TREM-1单克隆抗体(mAb)，购自Invitrogen公司;纯化的人TREM-1蛋白和兔抗人TREM-1多克隆抗体由本室自制。HRP标记羊抗兔IgG，购自北京博奥森生物技术有限公司，TMB底物及显色剂，沈阳惠民公司产品。BIOTEK Elx800型酶标仪等。

1.2方法

1.2.1酶标抗体工作浓度的选择 采用夹心ELISA法，用PBS将兔抗人TREM-1多抗稀释为100 μg/L，每孔 100 μl包被于酶标板，4℃过夜，加洗涤液洗板5次，加入封闭液37℃孵育2小时，再……