吴彦青 高 颖 朱陵群 娄丽霞 张东梅

（1.天津中医药大学，天津 300193；2.北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室，北京 100700）

血脑屏障（BBB）是机体参与固有免疫的内部屏障之一，维持中枢神经系统（CNS）正常功能和内环境稳定所必需的一种弥散屏障［1-4］。BBB完整性的破坏已被证明为多发性硬化（MS）和其理想动物模型即实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）发病机制中的重要环节［5-11］，并且在 MS 的发病过程中起着重要的作用［12］。为进一步明确MS血脑屏障功能及结构的动态变化，本研究观察EAE小鼠血脑屏障通透性的动态变化，探讨脑和脊髓内紧密连接构成蛋白（ZO-1）基因在EAE发病过程中几个重要时间点的动态表达变化以及其与血脑屏障功能变化的关系，并为MS在发病过程中血脑屏障完整性破坏提供分子结构上的依据以及下一步可能干预的途径。

1 材料与方法

1.1 动物 C57BL/6小鼠购自中国医学科学院实验动物研究所， 许可证号：SCXK （京）：2005-0013。 选用 8～10周龄雌性C57BL/6小鼠108只，体质量（18.4±0.8）g。实验小鼠饲养在中国中医科学院基础研究所二级动物中心饲养室。

1.2 试剂及药物 MOG35-55多肽（MEVGWYRSPFSRVVHLYNGK）由北京赛百盛生物工程公司合成，纯度（HPLC）98.3%；完全弗氏佐剂（CFA）购自美国 sigma公司，批号：049K8700；百日咳毒素（PTX）购自美国sigma公司，批号：P7208；结核分支杆菌菌（H37RA）购自美国 DIFCO 公司，批号：0172191；POWER SYBR GREEN PCR MASTER试剂购于美国ABI公司，批号：4367659。益肾达络饮（由熟地黄、石菖蒲、栀子、豨莶草等药物组成），饮片购自北京中医药大学东直门医院，常规方法煎煮，收集滤液并文火煎煮浓缩制成2 g生药/mL的水提物。醋酸泼尼松，天津力生制药股份有限公司，批号：081206，用去离子水配制成0.39 mg/mL溶液。……