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抗乙型肝炎病毒表面抗原T7噬菌体抗体库的构建

2012-01-11刘兵马晓宇李响罗恩杰

微生物学杂志 2012年1期

刘兵,马晓宇,李响,罗恩杰

(1.中国医科大学基础医学院病原生物教研室,辽宁沈阳110001;2.中国医科大学96期七年制临床专业,辽宁沈阳110001;3.沈阳医学院奉天医院药剂科,辽宁沈阳110024)

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)引起的,乙型肝炎是世界范围公认的重要传染病。有调查表明,全球约20亿人被证明曾感染过HBV,3~4亿人为HBV慢性感染,其中25%~40%最终将死于肝硬化和肝癌,每年死于乙型肝炎的患者大约为100万人左右[1-2]。因此,研究乙型肝炎的治疗具有重要的实际意义。目前,常用的治疗慢性乙型肝炎药物有α干扰素、拉米夫定、阿德福韦及恩替卡韦等[3-4],其作用有效,但也都有副作用,由于慢性乙型肝炎具有长期性、难治性、进展性和复发性的特点,现有的抗HBV治疗药物还难以彻底清除患者体内的HBV,因此,乙型肝炎治疗依然是困扰医学工作者的一项难题。乙型肝炎病毒表面抗原(Hepatitis B surface antigen,HBsAg)是一种糖蛋白,由HBV的S基因编码,能够刺激机体产生保护性抗体抗-HBs。单链抗体(single-chain fragment of variable region,scFv)具有穿透力强、容易到达靶细胞及在治疗时不会引起免疫排斥反应等优点,如与毒素连接可直接攻击病毒感染细胞,达到治疗病毒感染的目的。构建T7噬菌体单链抗体(scFv)库筛选抗HB-sAg抗体,可以为表达出小分子的抗HBsAg单链抗体,并将scFv与毒素连接,为最终探索出一种新的治疗方法治疗HBV感染奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 抗-HBs阳性患者全血5例抗-HBs阳性恢复期患者全血,采自沈阳市第五人民医院。

1.1.2 主要试剂T7 Select10-3噬菌体载体试剂盒购自Novagen公司;RT-PCR试剂盒……

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