孟飞，高紫维，孙明波，张怡轩

(沈阳药科大学生命科学与生物制药学院，辽宁沈阳110016)

人参皂苷F1(Ginsenoside F1，GF1)于1976年由Yahara等［1］在人参(Panax ginseng C.A.Meyer，Asian ginseng)叶中分离得到。经药理研究表明，稀有GF1能够抑制人体骨肉瘤细胞U2OS的增殖［2］，减少UV-B导致的细胞死亡并防止UV-B诱发的人类HaCaT角化细胞凋亡［3］、拮抗人的血小板凝集［4］。但GF1在人参叶、花、果中的含量甚微，从天然人参中提取十分困难，因此GF1的获得十分有限。然而人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1，GRg1)获得相对容易，它的结构与GF1十分相似［5］，仅在C6位多一个糖基，去掉GRg1分子C6侧链的O-Glc中的β-葡萄糖基，即可得到GF1。如何高效地获得更多更纯的GF1，具有极其重要的药用价值和经济意义。利用微生物转化制备稀有人参皂苷已成为获得稀有人参皂苷的有效途径［6-8］。目前采用微生物转化GRg1的研究报道较少，且产物多为GRh1［9］。本实验室筛选保藏的1株真菌菌核青霉(Penicillium sclero-tiorum)2246，所产生的酶能特异性水解GRg1C6位上的葡萄糖基，生成GF1［10］，但其转化率不高，且转化能力不稳定。原生质体诱变技术是一种行之有效的菌种选育技术，由于微生物原生质体去除了细胞壁，外界的物质很容易穿透细胞膜进入细胞内，造成原生质体对外界各种诱变因子的敏感性大大增强，应用诱变剂对原生质体进行处理，有可能在短期内获得产量高、生产性能好的菌株。本实验通过对菌株2246原生质体制备和再生过程中的几个重要影响因素进行研究，确定了原生质体制备和再生的最佳条件，并对原生质体进行了亚硝基胍(NTG)复合紫外诱变，以期提高菌株2246将GRg1转化为GF1的能力，提高其转化率。……