郑海英，蔡少丽，黄平，杨威，黄杨，杨鹤，张爱平，刘小琳，黄建忠

(福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心生命科学学院福建省现代发酵技术工程研究中心，福建福州350108)

纤维素酶是指能水解纤维素β-1，4葡萄糖苷键，使纤维素变成纤维二糖和葡萄糖的一组酶的总称，由内切β-葡聚糖苷酶、纤维二糖水解酶、β-葡萄糖苷酶3个主要成分组成的诱导型复合酶系［1-2］。按最适作用pH不同，可分为酸性纤维素酶(最适pH为4.8左右，由绿色木霉、里氏木霉、康氏木霉、黑曲霉、青霉等产生)、中性纤维素酶(最适pH为6～8，由长梗木霉、腐质霉、芽胞杆菌等产生)和碱性纤维素酶(最适pH为8～11，由嗜碱芽胞杆菌、腐质霉等产生)。中性纤维素酶在纺织、造纸、饲料、食品和制药等行业均具有广泛的应用前景［3］，尤其是在牛仔布“洗旧”整理加工方面具有显著优势［4］。但中性纤维素酶用量大且生产成本高，在一定程度上限制了该酶的开发与应用。因此可以利用分子技术构建高产菌株，优化发酵工艺以提高中性纤维素酶的产量，从而降低成本。目前已有研究报道通过克隆其基因并试图构建重组高产菌株，但仍存在表达量不高等问题［5-6］。本研究拟通过对本课题组已构建好的产中性内切葡聚糖酶的毕赤酵母基因工程菌EIM-50-eg2的发酵条件进行优化，为该酶的生产应用提供基础参数。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株毕赤酵母基因工程菌EIM-50-eg2，工业微生物教育部工程研究中心克隆表达内切中性纤维素酶的高产菌株。……