任毅 周琦# 唐安洲 谭颂华 方勤 谢利红 尹时华

1 广西医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科(南宁 530021)

脑红蛋白(neuroglobin ,NGB)由德国Burmester等[1]于2000年首次报道，是存在于人和小鼠脑内的一种功能类似于肌红蛋白的携氧球蛋白,其具有高的氧亲和力且能和氧可逆性结合。目前研究表明[2～4],NGB是一种分子量约为17 kD的单体,其结合氧的能力弱于肌红蛋白,但是强于血红蛋白。NGB的氧结合特性与脊椎动物肌红蛋白类似,提示二者有类似的功能，即NGB也有贮氧、促进氧向线粒体扩散或直接介导氧向线粒体传递的功能。2005年，尹时华等[5]采用RT-PCR方法,从小鼠脑组织总RNA中扩增出NGB基因的全序列cDNA,构建了携带绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标签的重组质粒pEGFP-NGB，并通过GeneJamer介导NGB基因转染至培养的神经胶质细胞，观察到培养的神经胶质细胞中NGBmRNA和蛋白水平均有较高表达,成功证明了NGB基因离体转染的可行性，为NGB基因治疗提供了理论依据。本实验试图从电生理学和形态学方面证明NGB基因转染对庆大霉素致豚鼠耳毒性的保护作用，从而为今后临床治疗感音神经性聋提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物分组及模型的制备 实验动物为耳廓反射正常、体重300～350克、排除了ABR反应阈大于40 dB SPL的健康花色黑目豚鼠120只(广西医科大学动物实验中心提供)，雌雄不限。动物适应性饲养1周后随机分为5组，每组24只，Ⅰ组为空白对照组，不作任何处理，Ⅱ组为人工外淋巴液对照组(经左耳注入人工外淋巴液)，Ⅲ组为人工外淋巴液实验组(经左耳注入人工外淋巴液后肌肉注射庆大霉素)，Ⅳ组为空质粒转染组(经左耳注入空质粒pEGFP-C1后肌肉注射庆大霉素)，V组为NGB基因转染组(经左耳注入pEGFP-NGB后肌肉注射庆大霉素)。……