王医平， 张 儒， 王红鸽

(陕西渭南职业技术学院， 陕西 渭南 714000)

玻璃体积血(vitreous hemorrhage，VH)是临床上常见的一种眼科疾病，积血一旦形成，不仅破坏玻璃体正常透明结构，使屈光间质混浊，导致视力下降或丧失，同时对眼部组织产生严重的破坏作用。目前西医治疗多采用玻璃体切割术、视网膜冷凝术及一些激光手术等。笔者照中医理论，将辨证与辨病相结合，运用四妙勇安汤合补阳还五汤加减治疗玻璃体积血取得了较好的临床疗效。为进一步探讨四妙勇安汤合补阳还五汤治疗本病的作用及机理，笔者进行了如下实验，现报道如下。

1 实验材料

1.1 实验动物 健康家兔32只，体重1.0～2.0 kg，雌雄不限，购于西安交通大学实验动物中心。经裂隙灯显微镜、眼底镜检查眼前节及眼底均无明显异常，饲料及青菜喂养。

1.2 药品 四妙勇安汤合补阳还五汤(玄参30 g，银花20 g，当归15 g，甘草10 g，黄芪30 g，桃仁、红花、赤芍、地龙、川芎各10 g，猪苓、茯苓各15 g，三七粉6 g，每剂药煎好后浓缩至100 mL，放冰箱冷藏备用)；安妥碘注射液2 mL 0.4 g；0.9%氯化钠注射液250 mL 2.25 g；盐酸利多卡因注射液5 mL 0.1 g；0.25%氯霉素滴眼液8 mL 20 mg；1%阿托品滴眼液8 mL

1.3 试剂 兔IL-6双抗体夹心法酶联免疫检测(ELISA)试剂盒(由森雄制剂公司提供)。

2 实验方法

2.1 动物分组 32只家兔按数字随机法分为A正常组(空白对照组)、B模型组、C对照组(安妥碘组)和D实验组(四妙勇安汤合补阳还五汤组)，每组8只。

2.2 模型制备 实验动物适应性喂养3 d，B、C、D 3组均造成右眼玻璃体积血模型。先用生理盐水清洁右眼结膜囊，用1%阿托品滴眼液散瞳，1%丁卡因滴眼行结膜表面麻醉，酒精消毒后用lmL一次性注射器从兔耳缘静脉取血0.5 mL备用，迅速用9号针头于1点位距角膜缘3 mm处直接刺透巩膜，抽取玻璃体液0.2 mL，迅速于10点位距离角巩膜缘3 mm处用9号针头向玻璃体内注入自体血0.2 mL，立即拔除针头，用消毒棉签按压30 s后滴0.25%氯霉素滴眼液1滴。造模后每天以0.25%氯霉素滴眼液滴眼，3次/d；1%阿托品滴眼液滴眼，1次/d。造模24 h后用裂隙灯显微镜及检眼镜观察造模兔眼，以确认玻璃体积血造模成功。

2.3 给药方法 造模后24 h开始给药，连续用药5周，根据施新猷[1]介绍的以人的常用量推算兔的用药量。A正常组不予任何干预；B模型组每天用生理盐水灌胃，1次10 mL，1次/d；C对照组，安妥碘 0.125 g，肌肉注射，1次/d；D实验组，每天灌服中药“四妙勇安汤合补阳还五汤”浓缩煎剂10 mL/kg，2次/d。

2.4 标本采集及动物处理 治疗结束时，在眼科常规检查完毕后，在兔右眼结膜囊内滴1%丁卡因行表面麻醉，于10点位距角膜缘3 mm处用4号针头抽取玻璃体液0.5 mL，并予5000r/min离心，5 min后，立即贮存于-20 ℃待测。

观察指标：采用酶联免疫检测法(ELISA)检测玻璃体液中的IL-6含量，严格按试剂盒说明书进行操作

2.5 统计学处理 采用SPSS 19.0统计软件进行分析，计量资料以均数士标准差表示，组间比较用One-way ANOVA检验，方差齐使用Bonferroni法，方差不齐使用Tamhane’sT2法，以P<0.05为显著统计学差异，以P<0.01为极显著统计学差异。

3 实验结果

玻璃体液中IL-6的含量正常组IL-6的含量较低；模型组IL-6的含量显著增加，与正常组比较P<0.01；对照组、实验组均能明显降低IL-6的含量，与模型组比较P<0.01；实验组降低的更为明显，与对照组相比P<0.05，见表1。

表1 各组实验兔玻璃液中IL-6的含量( ±s )

表1 各组实验兔玻璃液中IL-6的含量( ±s )

组别nFe2+浓度(pg/mL)正常组858 75±1 37 模型组8287 56±11 34∗对照组8201 69±9 17∗#实验组8152 14±1 87∗#△

注：与正常组相比,*P<0.01；与模型组相比,#P<0.01；与对照组相比,△P<0.05

4 讨论

4.1 玻璃体积血的中医认识 玻璃体积血属中医“内障”“血证”范畴。轻中度玻璃体积血，患者仅觉眼前有飞蚊，云雾移动，属“云雾移睛”，“视瞻昏渺”；重度玻璃体积血，患者视物盲而不见，属“暴盲”；若合并血溢于瞳神属“血灌瞳神”；眼外伤所致属“撞击伤目”。本病主要病机可概括为火热灼伤目络、络破血溢，气虚不摄血、气滞血瘀，瘀血不去、日久出血，血溢脉外、目失濡养等。中医治疗本病治疗多采用分期论治，提倡出血早期凉血止血，防止进一步出血；中期活血化瘀，加速积血吸收；晚期多用软坚散结之法防止积血机化；也有学者采用分证论治，所分证型虽各有差异，但均与血热、血瘀、阴虚、气滞、气虚有关，治疗上多在止血活血的基础上加用清肝、养阴、益气的药物。

4.2 四妙勇安汤与补阳还五汤 笔者在临床中按照中医理论，将辨证与辨病结合相结合，采用清热养阴利水、益气活血祛瘀法治疗本病，方用四妙勇安汤合补阳还五汤加减，疗效较为满意。四妙勇安汤是清代鲍相璈用来治疗手足脱骨疽之方，曰此方：“一连十剂，永无后患，药味不可少，减则不效”[2]。 既然本方能够治疗脱骨疽，则必有促进代谢、改善血液循环作用；补阳还五汤是清代王清任治疗气虚血瘀中风之方，具有益气活血祛瘀功效。故推而广之，将两方合用治疗玻璃体积血。方中玄参清热凉血、养阴生津，银花清热解毒、凉散风热，黄芪益气，当归、桃仁、红花、赤芍、地龙、川芎活血，茯苓、猪苓利水渗湿，三七化瘀止血，甘草清热解毒，调和诸药，全方共奏益气活血、清热养阴利水之功。

4.3 四妙勇安汤合补阳还五汤对玻璃体积血后玻璃体液中IL-6含量的影响 玻璃体是屈光系统重要组成部分，透明度要求极高，与视网膜关系密切，但本身代谢极低，出血不易吸收，对视力影响大，常导致增殖性视网膜病变(proliferative vitreotinopathy，PVR)的发生。PVR是眼内组织损伤后过度修复的反应，同时伴有复杂的免疫调节机制[3]，而损伤初期的炎症是启动细胞增生修复的先决条件。研究证实[4～5]，在PVR形成过程中有多种细胞因子参与，这些细胞因子对细胞移行、增殖、胶原合成以及PVR膜的形成起到重要作用，白介素-6(IL-6)是其中重要的炎性因子之一。IL-6是由单核巨噬细胞、淋巴细胞产生的炎性因子，巨噬细胞在清除积血的过程中，又可诱导眼内局部的炎症反应，细胞的移行和增殖，诱导PVR的发生。

本实验结果显示，模型组IL-6的含量显著增加，四妙勇安汤合补阳还五汤可显著降低降低IL-6的含量，与模型组、对照组均有显著差异，表明两方合用可加速玻璃体积血的吸收，减少炎性因子的释放，降低PVR 形成过程中IL-6的表达，从而防止PVR的发生，同时也为临床应用四妙勇安汤合补阳还五汤治疗玻璃体积血提供了依据。

[1]施新猷.医用实验动物学[M].西安：陕西科学技术出版社，1989：417.

[2]鲍相璈.验方新编[M].天津：天津科学技术出版社，1991：234.

[3]石一宁，惠延年.增殖性玻璃体视网膜病变的免疫机制[J].国外医学眼科分册，1995，19：239.

[4]惠延年，石一宁，张新海，等.巨噬细胞诱发的实验性增殖性玻璃体视网膜病变中的几种早期炎性细胞因子[J].中华眼科杂志，1999，35：140～143.

[5]高平，惠延年，马吉献，等.视网膜前膜内相关炎性细胞因子的免疫组化研究[J].眼科新进展，2000，20(6)：390～392.