王艳宁， 高桂娥， 黄仕孙， 吴曙粤

(广西南宁市第一人民医院， 广西 南宁 530022)

中药退黄外洗液是由茵陈、柴胡、郁金、薄荷脑等16味中药组成的复方制剂，具有行气解郁、利胆退黄等功效，主要用于预防和治疗新生儿黄疸。经长期的临床验证，效果显著[1～3]，另其质量控制简单易行，重现性好。为更好探讨中药退黄外洗液的质量稳定性，本试验进行了相关检测，现报道如下。

1 仪器和试药

1.1 仪器 电子分析天平(GR-202，精度十万分之一)；AE240S电子天平(十万分之一)；酸度计(pHS-3C)；高效液相色谱仪(Shimadzu LC-2010、Shimadzu 20AD)。

1.2 试药 大黄对照药材(批号902-9002)；薄荷脑对照品(批号0728-9304)；栀子苷对照品(批号10749-200613)，均购自中国药品生物制品检定所。中药退黄外洗液(批号为071125，071115，071127)，以及缺大黄的阴性对照样品、缺薄荷脑的阴性对照样品、缺栀子的阴性对照样品均由南宁市第一人民医院提供；乙腈、甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。药品的包装材料：钠盖玻璃瓶。

2 中药退黄外洗液的质量标准

2.1 性状 按照中国药典2005年版一部附录XIA“溶液颜色检查法”检测3个批号中药退黄外洗液的性状，均为黄色澄明液体。

2.2.1 大黄的鉴别[4]取本品10 mL，用乙醚振摇提取2次，每次20 mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1 g，加甲醇20 mL，浸泡1 h，滤过，取滤液5 mL，蒸干，残渣加水10 mL使溶解，再加盐酸1 mL，加热回流30 min，立即冷却，用乙醚分2次提取，每次20 mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为对照药材溶液。按照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各5 μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。缺大黄的阴性对照无干扰。

2.2.2 薄荷脑的鉴别[4]取本品10 mL，置具塞锥形瓶中，加乙醚10 mL，振摇数分钟，静置分层，分取乙醚层，浓缩至2.5 mL，作为供试品溶液。另取薄荷脑对照品，加乙醚制成每1 mL含2 mg的的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯(17：3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。缺薄荷脑的阴性对照无干扰。

2.3 检查

2.3.1 装量 每个容器装量：不少于标示装量的97%；平均装量：不少于标示装量(《中国药典》2005版一部附录Ⅻ C)。

2.3.2 微生物限度 照微生物限度检查法检查(《中国药典》2005版一部附录XⅢC[2])。

2.4 栀子苷的含量的测定[5]

2.4.1 色谱条件 色谱柱：Agilent Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：甲醇-水(25∶75)；流速：1.0 mL·min-1；柱温：35℃；检测波长：238 nm；进样量：10 μL。理论板数按栀子苷峰计算不低于2000，栀子苷与其相邻峰均能达到基线分离，分离度R>1.5。

2.4.2 对照品溶液的制备 精密称取栀子苷对照品13.65 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇定容制成浓度为0.273 mg·mL-1的对照品溶液。

2.4.3 供试品溶液的制备 精密量取中药退黄外洗液2 mL，置100 mL量瓶中，加甲醇定容，摇匀，滤过，即得。

2.4.4 阴性供试品溶液的制备 取缺栀子的阴性对照样品，按“2.2.3”法制成。

2.4.5 线性考察 精密量取栀子苷对照品溶液(0.273 mg·mL-1)0.2、0.5、1.0、2.0、3.0 mL，置于10 mL量瓶中，稀释至刻度，摇匀。得每1 mL含栀子苷5.46，13.6， 27.3，54.6， 81.9 μg的对照品溶液，按3.1项下色谱条件下分别进样测定(进样量为10 μL)，测定峰面积，以栀子苷对照品进样量(X)为横坐标，峰面积积分值为纵坐标(Y)，绘制标准曲线，得回归直线方程为 Y=15 998.125X +11 969.984(r=0.999 8)。结果表明，栀子苷进样量在5.46～81.9 μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。加样回收率为98.38%，RSD=1.53%(n=6)，精密度试验以及重复性试验效果满意。可制订本制剂含栀子苷的量不得少于0.75 mg/ mL。

3 稳定性考察及结果

按中药退黄外洗液的质量标准“2”项下，三批样品置于室温常规的贮藏条件下，在0、3、6、9、12、18、24月分别进行性状、鉴别、检查等以及栀子苷的测定。结果各项指标未发生显著变化，其性状均为棕黄色液体，味苦、辛凉；薄层鉴别中均能清晰检出大黄和薄荷脑的斑点；Ph值在4.6～5.1之间；密度为0.97～0.98；装量符合要求；微生物监测未检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、活螨；细菌总数≤100个/g；霉菌、酵母菌的总数≤100个/g，均符合要求。制剂中栀子苷的含量变化详见表1。表明中药退黄外洗液在两年内的质量稳定，无明显变化。

表1 3批制剂中栀子苷含量 (mg/mL，n=3)

4 讨论

长期留样观察法[6～7]是指在接近药物的实际贮存条件下进行，稳定性考察的目的是考察药物制剂在温度、湿度、光线的影响下随时间变化的规律，为药品的生产、包装、贮存、运输条件提供科学依据，同时通过试验建立药品的有效期[8]。而留样观察法是与药品的生产、储存、流通的实际情况接近，其试验结果可靠，试验方法简单，为此，笔者选用了长期留样观察法对中药退黄外洗液进行稳定性的考察。

结果表明，中药退黄外洗液3批制剂在两年的检测中，其外观性状、鉴别、微生物限度等方面在各阶段都没有显著性变化，含量经两年考察，变化很小，表明中药退黄外洗液是稳定的。另外，中药退黄外洗液包装用的是钠盖玻璃输液瓶，对制剂的质量无影响，具有良好的防潮防霉变等作用，故本制剂可定有效期为2 a。

[1]吴曙粤，高桂娥，王利民，等.新生儿退黄外洗液的临床效果观察[J].广西医学，2005，27(12))：2014.

[2]王利民，吴曙粤，黄春兰，等.新生儿退黄洗液早期干预新生儿黄疸的疗效[J].实用儿科志，2006，21(14)：944～945.

[3]高桂娥，吴曙粤，黄仕孙，等.新生儿退黄外洗液的制备和临床观察[J].中成药，2006，28(11)：附4～附5.

[4]黄仕孙、王艳宁、髙桂娥，等.中药退黄外洗液的质量标准中薄层鉴别的探讨[J].云南中医中药杂志，2009，30(8)：46～51.

[5]黄仕孙，王艳宁，高桂娥，等.中药退黄外洗液的质量标准研究[J].中国药房，2010，21(15)：1399～1400.

[6]赵绪元，李焕德，向大雄，等.加味脑乐静合剂稳定性的跟踪分析[J].中草药，2002，33(2)：118～120.

[7]鲁汉兰，徐雅敏，张亚金，等.疏肝舒乳颗粒稳定性考察[J].中药材，2003，26(5)：367.

[8]阎海燕，张海英.金氏肾炎丸的稳定性[J].新疆中医药，2009，27(1)：49～50.