战 鹏 张 明 范海涛 温都苏 李然伟 刘禄成 (吉林大学第二医院泌尿外科，吉林 长春 130041)

MiRNA是体内一大类内源性表达的小分子非编码RNA，称为微小RNA。这些小分子RNA参与人类基因组中1/3左右基因的表达调控，并在细胞分化、增殖、凋亡甚至肿瘤的发生发展中发挥重要作用〔1，2〕。目前，与肿瘤相关的一些miRNA已经被发现，其中miRNA-21被认为是一种癌基因，参与多种病理生理过程，在肿瘤细胞的迁移、浸润和转移中起关键作用〔3，4〕。本实验采用免疫组织化学(SP)法检测miRNA-21在膀胱癌中的表达情况，并分析其与膀胱癌生物行为的关系。

1 材料与方法

1.1 材料 收集我院2005年1月至2011年12月间膀胱癌石蜡包埋标本50例。全部病例术前均未放疗、化疗及免疫治疗。其中男性33例，女性17例;年龄27～81岁。肿瘤细胞分级：G1 13例，G2 26例，G3 11例。肿瘤临床分期按世界卫生组织TNM分期校准：A期15例，B期21例，C期9例，D期5例。同期收集膀胱镜下膀胱黏膜正常组织石蜡标本20例，经病理证实为正常组织或慢性炎症。所有标本常规石蜡切片4 μm厚。miRNA-21单克隆抗体购自美国Sigma公司。SP试剂盒及DAB显色液均购自中杉生物技术公司。

1.2 免疫组化染色 切片常规脱蜡，梯度酒精脱水，30%H2O2甲醇封闭内源性过氧化物酶，枸橼酸高压修复，小牛血清封闭，DAB显色，苏木精衬染，用PBS作阴性对照。

1.3 结果判定 细胞呈黄褐色着色为表达阳性，无着色为表达阴性。

1.4 统计学处理 采用SPSS17.0软件进行数据分析，数据以x±s表示，均数间比较用t检验。

2结果

2.1 miRNA-21蛋白的表达 miRNA-21主要定位于胞核，在膀胱癌中阳性表达率为76%(38/50)，膀胱正常组织中阳性表达率仅为5%(1/20)，两者比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。……