张文利，马 莉，辛 毅，徐跃飞，任 风，马郁芳，2

(1.大连医科大学，2.辽宁省糖生物学与糖生物工程重点实验室，辽宁 大连 116044)

生物信息资源在耻垢分枝杆菌EmbB多克隆抗体制备中的应用

张文利1，马 莉1，辛 毅1，徐跃飞1，任 风1，马郁芳1，2

(1.大连医科大学，2.辽宁省糖生物学与糖生物工程重点实验室，辽宁 大连 116044)

目的 建立通过生物信息学手段制备耻垢分枝杆菌(M.smegamatis)EmbB(Sm EmbB)多克隆抗体的方法。方法 应用生物信息资源在Sm EmbB的N端寻找一段18个氨基酸的特异短肽，合成后将其与白喉类毒素分子相连，以所形成的复合物免疫动物制备抗Sm EmbB的多克隆抗体。结果 Western blot结果显示获得的抗体可特异地作用于Sm EmbB。结论 通过生物信息学手段制备多克隆抗体方法的建立解决了对蛋白质功能研究中缺乏抗体的困扰，为特殊蛋白质的抗体制备提供了借鉴。

耻垢分枝杆菌;EmbB;生物信息;多克隆抗体

细胞壁是分枝杆菌所特有的结构，对细菌的生命、形态、毒性传播等非常重要。分枝杆菌细胞壁中具有两种主要成分［1-2］，即 mAGP(mycolic acid-arabinogalactan-petidoglycan)和LAM(lipoarabinomannan)。mAGP是由分枝菌酸、阿拉伯聚糖半乳聚糖和肽聚糖三种成分组成，是细胞壁的核心成分，直接影响了细胞壁的完整性。LAM为分枝杆菌细胞壁中另一种主要成分，主要由与细胞质膜相连的肌醇脂、甘露聚糖和阿拉伯聚糖三种成分组成，它与细菌的生命形态没有直接相关性，但与细菌导致的免疫应答及毒性传播等有关。阿拉伯聚糖是细胞壁中两种主要成分中共有的重要组成成分，在维持细胞壁的完整性及毒性方面起着重要作用。……