王晶晶 倪 明 田德英

野生型铜绿假单胞菌和新型mucA突变铜绿假单胞菌生物膜形成的动态观察

王晶晶 倪 明 田德英＊

（华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科感染性疾病研究所，武汉430030）

目的 观察新型mucA突变的粘液型菌株PA17和野生型菌株PAO1生物膜（biofilm，BF）形成的动态过程，并比较2株菌生物膜形成过程的差异。方法 SYTO9／PI荧光探针标记PAO1和PA17，体外建立1d，3d，5d，9d时间点PAO1及PA17的BF模型，激光共聚焦显微镜（CLSM）观察两株菌BF动态形成的过程。结果 通过SYTO9／PI双染可以动态观察PAO1菌株和PA17菌株的BF形成过程；PAO1菌株和PA17菌株的BF形成过程有差异：PAO1菌株1d时已形成微菌落，3d时形成覆盖整个玻片的生物膜结构，而PA17菌株1d时仅有散在的不可逆粘附细菌，3d时才形成微菌落，5d时形成生物膜结构；随着时间的推移，2株菌生物膜形成的厚度均逐渐增加，且死菌的比例也逐渐增加。结论 PAO1和PA17BF的动态形成过程存在差异，而PA17与PAO1生物膜形成存在的差异可能与其mucA基因突变造成大量藻酸盐的产生有关。

铜绿假单胞菌；生物膜；mucA；SYTO9／PI

铜绿假单胞菌是一种广泛存在于水和土壤环境中的革兰氏阴性菌，也是引起肺囊性纤维化和烧伤患者感染的条件致病菌［1，2］。铜绿假单胞菌有两种生存状态：浮游状态和生物膜状态。其中生物膜状态是细菌在自然界中存在的主要状态。生物膜状态下细菌形成微菌落聚集体，存在于胞外多聚基质中，且形成膜状并不可逆的粘附于有活性或无活性的物体表面［3，4］。生物膜是临床上引起反复难治性感染的一个重要原因［5］。……