HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中丹参素钠的浓度
2011-12-08熊礼燕王庭芳郑莉萍
王 晶,金 磊,熊礼燕,王庭芳, 2,郑莉萍, 2,张 宁,邹 豪,张 川
(1.第二军医大学药学院新药研究中心,上海 200433;2.福建中医药大学药学院,福建 福州 350108;3.上海市徐汇区中心医院,上海 200031)
HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中丹参素钠的浓度
王 晶1,金 磊1,熊礼燕1,王庭芳1, 2,郑莉萍1, 2,张 宁3,邹 豪1,张 川1
(1.第二军医大学药学院新药研究中心,上海 200433;2.福建中医药大学药学院,福建 福州 350108;3.上海市徐汇区中心医院,上海 200031)
目的建立液质联用色谱法(HPLC-MS/MS)测定SD大鼠血浆中丹参素钠的浓度。方法血浆样品采用液液萃取方法进行预处理。色谱柱为Diamonsil C18柱(4.6 mm×200 mm,5 μm);流动相为甲醇-水(含0.01‰甲酸)=(80:20);流速为1.0 ml/min;质谱条件:采用ESI离子源,负离子检测,选择MRM测定丹参素钠和酮洛芬197→135 m/z和253→209 m/z。结果丹参素钠在10.6 ~1 060 ng/ml检测浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.999 6),最低定量限为10.6 ng/ml,日内和日间精密度的RSD<7.8 %,回收率在99 %到102 %之间。结论该方法灵敏度高、快速、简单、准确,适用于血浆样品中丹参素钠的含量测定以及临床前实验研究。
丹参素钠;HPLC-MS/MS;血药浓度
丹参来源于唇形科植物丹参(SalviamiltiorrhizaBge.)的干燥根及根茎。丹参有扩张冠状动脉,防止心肌缺血[1],促进血液循环[2],降血脂,消炎抗菌作用[3]。丹参主要分为脂溶性和水溶性成分[4]。水溶性成分中丹参素的含量较高,活性较强,作为丹参的质量控制指标成分。
丹参素[D(+)-β-(3,4-二羟基苯基)-乳酸]具有抗炎、抗氧化[5]、抗血栓、抗心肌缺血、抗肿瘤[6]等作用,并且能清除自由基和抗氧化[7],抑制血小板聚集[8],改善微循环,调节血脂代谢等作用[9]。常用的检测方法有LC-UV[10~12], LC-FLD[13], LC-DAD[14]。本文采用HPLC-MS/MS方法建立了SD大鼠血浆样品中丹参素钠的含量测定方法。
1 材料与仪器
1.1药品和试剂 丹参素钠对照品(中国药品生物制品检定所,纯度99.6 %),酮洛芬对照品(中国药品生物制品检定所,含量95.6 %),甲醇为美国Merck公司生产的色谱纯试剂,乙酸乙酯为上海胜德化工有限公司生产,甲酸为FEDIA公司,浓盐酸为国药集团化工有限公司生产,水为去离子水。……
