李 萍，田 方，宋 琦，刘焕霞，李孟芳，魏 丹

（遵义医学院附属口腔医院 病例科，贵州遵义563000）

Zuk等[1]于2001年首次从人抽取脂肪中分离出一种具有成纤维样形态的细胞亚群，并命名为提取的抽脂物细胞(processed lipoaspirate,PLA)，经特异因子诱导可向骨细胞、脂肪细胞、肌细胞和软骨细胞等多谱系细胞分化，次年，又从PLA细胞亚群中分离出形态均一、经分子生物学和生物化学检测可多系分化的细胞克隆，称之为脂肪来源干细胞(Adipose-derived stem cells ，ADSCs)[2]。ADSCs因其对组织损伤小、具有多系分化潜能，且来源广泛、获得率高、没有伦理道德问题等优点，有望替代骨髓组织来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成为自体成体干细胞来源，应用于临床移植治疗。

脂肪来源细胞培养普遍使用含血清的培养基，尤其是胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)。我们采用新生牛血清替代传统的胎牛血清培养分离的大鼠脂肪来源细胞，观察新生牛血清对大鼠脂肪来源细胞生长的影响，以期用价格较便宜的新生牛血清替代传统价格较贵的胎牛血清进行脂肪来源细胞培养。

1 材料和方法

1.1 主要实验材料 出生后3~5d的SD大鼠（我校实验动物中心）；Ⅰ型胶原酶（Sigma,美国）；DMEM/F12(1:1)培养基（Gibco,美国）；新生牛血清（杭州四季青）；超净工作台（苏州净化设备有限公司）；倒置相差显微镜（Olympus,日本）；CO2孵箱（Thermo,美国）。

1.2 大鼠脂肪来源细胞的分离和培养

1.2.1 切取大鼠腹沟股脂肪组织 取出生后4d的SD乳鼠4只，引颈处死、消毒，切腹股沟脂肪组织，剔除结缔组织及肉眼可见的小血管，含1%抗生素的PBS冲洗3次。具体方法详见参考文献[3]。

2.2.2 细胞悬液的制备 眼科剪将脂肪组织块剪成浆糊状；……