小半夏加茯苓汤含药血清对小鼠胚胎干细胞体外增殖及分化的影响*
2011-11-29宋殿荣王雅楠
宋殿荣 ,王雅楠 ,张 崴,朱 泽 ,郭 洁
(1.天津中医药大学第二附属医院妇科,天津 300150;2.天津医科大学,天津 300070;3.天津中医药大学,天津 300193)
小半夏加茯苓汤是《金匮要略》中经典止呕方剂,能够散饮降逆,和胃止呕,治疗“妊娠恶阻”疗效显著。半夏可否用于妊娠期疾病的治疗,是医家们争论的焦点。本课题组前期实验表明,清半夏含药血清无明显胚胎毒性。本实验通过体外细胞培养,进一步观察小半夏加茯苓汤含药血清对小鼠胚胎干细胞增殖和分化的影响,综合评价其胚胎毒性,为该方在妊娠期的临床应用提供实验依据。
1 材料和方法
1.1 动物 健康未交配过的Wistar雄鼠30只,体质量(230±10)g,许可证编号:SCXK(津)2009-0001。天津中医药大学实验动物中心适应性饲养3 d后进行实验。其中10只灌服小半夏加茯苓汤水煎液、10只灌服清半夏水煎液、10只灌服生理盐水做对照。
1.2 药物 小半夏加茯苓汤组成:清半夏18 g,生姜15 g,茯苓9 g,制备成含生药1 kg/L。清半夏18 g,制备成水煎液含生药0.5 kg/L,由天津中医药大学第二附属医院提供。参考《药理实验方法学》[1]与《实验动物学》[2],给药剂量=临床常用量×动物等效剂量系数×培养基内的稀释度,即动物等效剂量×培养基内的稀释度。大鼠(200 g)与人(70 kg)之间等效剂量系数为6.3,培养基内的稀释度为5(体外反应系统中含药血清添加量按20%计算),最终给药剂量小半夏加茯苓汤组为18.9g/(kg·d)、半夏组为8.1g/(kg·d)。等体积灌服生理盐水,连续给药3 d,末次灌胃后1~2 h腹主动脉取血,静置离心,灭活滤菌,保存备用。制备小半夏加茯苓汤含药血清、清半夏含药血清和空白血清。……
