余开焕 任俊 黄运涛 陈辰 宋湧

·论著·

急性胰腺炎大鼠血清蛋白质组学分析

余开焕 任俊 黄运涛 陈辰 宋湧

目的分析急性水肿型胰腺炎(AEP)和急性坏死型胰腺炎(ANP)大鼠血清蛋白质表达的差异，寻找判断AP病情的血清指标。方法采用4%或5%牛磺胆酸钠逆行注入胆胰管法分别制备AEP和ANP大鼠模型。应用血清蛋白质谱弱阳离子交换芯片(WCX2)，采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry，SELDI-TOF-MS)技术分析AEP和ANP大鼠血清蛋白质谱的差异。结果AEP和ANP大鼠血清蛋白质在质荷比为1000～50 000分子量之间有38个蛋白质差异表达(P<0.05)，其中AEP大鼠血清中分子量为9500和9700的两种蛋白质表达明显高于ANP大鼠。结论用SELDI-TOF-MS技术能检测出AEP与ANP大鼠血清蛋白质的差异表达。分子量9500和9700蛋白质的表达下降可能是AEP向ANP转化的征兆。

胰腺炎； 蛋白质组学； 血清； 质谱法

临床上将急性胰腺炎(AP)分为轻症急性胰腺炎(MAP)和重症急性胰腺炎(SAP)。MAP在病理学上表现为急性水肿性胰腺炎(AEP)，而SAP则多表现为急性坏死性胰腺炎(ANP)。本研究制备大鼠的AEP及ANP模型，应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry，SELDI-TOF-MS)技术分析AEP与ANP大鼠血清蛋白质谱表达的差异，寻找判断AEP进展为ANP的血清标志物。

材料和方法

一、动物模型制作及分组

雄性Wistar大鼠30只，体重250 g左右，购自武汉大学人民医院动物实验中心。按数字表法随机分为对照组、AEP组和ANP组，每组10只。参照Aho造模方法[1]，采用4%或5%牛磺胆酸钠(Sigma公司)以1 ml/kg体重的剂量逆行注入胆胰管分别制备AEP和ANP模型。对照组只接受剖腹术，胰管不注入任何液体。12 h后从大鼠心脏取血，离心取血清，部分血清用于淀粉酶的检测，其余置-80℃冰箱待用；取大鼠胰腺，常规病理检查，并依据Shmidt标准[2]评分。

二、血清蛋白谱检测

1．血清样本准备： 4℃下……