肖刚峰，张怀勤

(1.宁波市第二医院血液科，浙江 宁波 315000； 2.温州医学院附属第一医院心脏中心，浙江 温州 325000)

普伐他汀对人内皮祖细胞一氧化氮合成的影响

肖刚峰1，张怀勤2

(1.宁波市第二医院血液科，浙江 宁波 315000； 2.温州医学院附属第一医院心脏中心，浙江 温州 325000)

目的观察普伐他汀对人内皮祖细胞(EPCs)一氧化氮(NO)合成的影响。方法密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,培养7 d 后,收集贴壁细胞并分别加入普伐他汀，10 μmol/L及100 μmol/L 干预48 h , 免疫组化、荧光显微镜和流式细胞仪鉴定EPC , 用RT-PCR 方法测定对细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS) mRNA 表达的影响,并用硝酸还原酶法测定培养液中一氧化氮(NO)的水平。结果普伐他汀组的人内皮祖细胞eNOS mRNA 的表达、NO 的合成明显增加。结论普伐他汀可增加人内皮祖细胞eNOS mRNA的表达和NO 的合成。

普伐他汀; 内皮祖细胞; 一氧化氮; 一氧化氮合成酶

近年来研究发现他汀类药拥有独立于降脂外的多项心血管保护作用，它能上调成熟血管内皮细胞eNOS的活性和NO的合成[1]。但对血管内皮的前体细胞—内皮祖细胞的eNOS活性和NO合成有没有影响呢？我们特对此做了研究，现报道如下。

1 材料和方法

1.1材料 外周血取自成年健康男性，约70 ml。60 g/L羟乙基淀粉购自Sigma公司，VEGF购自PeproTech EC公司，纤维连接蛋白购自Roche 公司， PE- 抗CD34单克隆抗体购自CALTAG LABORATORIES， FITC-抗VE-Cadherin(钙黏着蛋白)单克隆抗体购自 Bender systemTM公司， PE-抗VEGFR-2(血管内皮生长因子受体2)单克隆抗体、FITC-抗CD133单克隆抗体购自R&D1公司。胎牛血清、胰酶、Hank′s液、D-Hank′s液、PBS均购自Gibco公司，培养基M199购自Sigma公司。DiI-ac-LDL(荧光标记的乙酰化低密度脂蛋白)购自Molecular probe 公司，普伐他汀由浙江大学医学院心血管病研究所惠赠。……