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鸡抗REV血清的制备与检定

2011-11-14李俊平杨承槐李启红夏业才黄建华陈永忠

中国兽药杂志 2011年9期
关键词:血清检测

李俊平,杨承槐,李启红,夏业才,黄建华,陈永忠

(1.中国兽医药品监察所,北京 100081;2.西宁市畜牧兽医站,西宁 810007)

网状内皮组织增生症病毒(REV)属于反转录病毒(Retroviridae)科,正反转录(Orthoretrovirinae)亚科,γ反转录病毒(Gammaretrovirus)(国际病毒分类委员会2008年病毒分类,http://www.ictvonline.org/virus Taxonomy.asp?version=2008)。该属包括禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)、鸡合胞体病毒(Chicken syncytial virus,CSV)和 Trager鸭脾坏死病毒(Trager duck spleen necrosis virus,TDSNV),引起的疾病统称为网状内皮组织增生症(Reticuloendotheliosis,RE)。发病主要表现为免疫抑制、生长抑制(矮小)、网状细胞瘤、淋巴组织和其他组织慢性肿瘤[1]。迄今尚无用于免疫预防该病的疫苗。

接种污染REV的疫苗可引起严重的免疫抑制[2-4],常常导致对其他疫苗的免疫失败。早在70年代,国外就有REV污染禽用疫苗的报道[5]。《欧洲药典》和《英国药典(兽药)》规定对生产禽源疫苗的种毒和生产原材料(主要是SPF鸡胚)需进行REV污染的专项检测 。《日本农林水产省兽医生物制品标准》要求对禽源病毒类活疫苗成品进行REV污染的专项检测,检测方法为免疫荧光法。我国《兽用生物制品规程》(二〇〇〇版)有关外源病毒检验的规定中,鸡检查法需检测REV抗体[8],但鸡胚检查法和细胞检查法均无法有效检出REV污染。为更好地控制和提高我国兽用生物制品质量,亟待建立适合我国实际国情的禽源活疫苗中污染REV的间接免疫荧光(IFA)检测方法。因此,需要制备及标定鸡抗REV的血清,从而为建立IFA法检测疫苗中REV污染奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病毒 网状内皮组织增生症病毒(REV)HA9901株,山东农业大学崔治中教授惠赠;MDV(HVT)、FPV、IBDV、RAV-1、RAV-2,中国兽医药品监察所保存;MDV(CVI988)、鸭瘟病毒、小鹅瘟病毒,企业疫苗毒。……

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