毕言锋，孙 雷，李 丹，汪 霞，徐士新，肖希龙

(1.中国兽医药品监察所，北京 100081;2.中国农业大学动物医学院，北京 100091)

沃尼妙林(Valnemulin，VLM)是新一代截短侧耳素(pleuromutilin)类动物专用半合成抗生素，主要用于防治猪、牛、羊及家禽的支原体病和革兰氏阳性菌感染［1-2］。目前，有关VLM的代谢研究资料还很少。EMEA研究表明VLM在大鼠、犬和猪体内代谢完全，并采用同位素标记和高效液相色谱法在大鼠血浆、肝、尿液及粪便中检测到22种代谢产物，但相关代谢物的结构没有鉴定［3］。

近年来，高分辨质谱仪(HRMS)已经广泛用于药物代谢物的筛选和鉴定［4］。随着质谱技术的发展，HRMS(如Q-TOF MS)可以采集分子及其碎片离子的高分辨率(大于10 000)准确质量(误差小于5 ppm)信息，有助于更准确的预测化合物元素组成和结构鉴定［5］。另外，相对于HPLC，UPLC采用颗粒更小(1.7 μm)的色谱柱填料，从而极大提高了复杂多组分样品分析的分离度和灵敏度［6］。因此，UPLC与高分辨Q-TOF MS联用，成为复杂生物体系中药物代谢产物分离和鉴定的有力工具［7-10］。

本研究将利用UPLC/Q-TOF MS技术分析大鼠口服VLM后尿液的代谢指纹，对VLM的体内代谢产物进行筛选，并根据代谢产物的精确质量和MS/MS信息进行结构鉴定，讨论VLM的体内代谢途径。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂 超高效液相色谱(UPLC，Waters公司);四级杆-飞行时间质谱仪(Synapt HDMS，Waters公司);大鼠代谢笼(意大利 Ugo Basile公司);沃尼妙林(含量大于95%);乙腈(色谱纯，Fisher公司);羧甲基纤维素钠(CMC-Na，国药集团试剂厂)。

1.2 样品采集及处理 Sprague-Dawley大鼠(购自北京维通利华实验动物技术公司)，雄性，体重180～220 g。动物房温度20～25℃，湿度50% ～60%，每天光照12 h。……