文萌，沈晓霞，沈宇峰，王志安

（1.浙江中医药大学，浙江 杭州 310053；2.浙江省中药研究所，浙江 杭州 310023）

中药杭白芷的发芽条件研究△

文萌1，沈晓霞2*，沈宇峰2，王志安2

（1.浙江中医药大学，浙江 杭州 310053；2.浙江省中药研究所，浙江 杭州 310023）

目的：研究不同发芽条件对杭白芷种子发芽的影响。方法：以杭白芷种子为材料，比较前处理方法、光照条件、发芽床、温度对杭白芷种子萌发的影响。结果：（1）75%乙醇浸泡1 min为最佳前处理方法。（2）黑暗状态下更有利于杭白芷种子的萌发。（3）纸上（TP）发芽床的发芽率高于纸间（BP）、砂上（TS）、砂床（S）3种发芽床。（4）15℃（16 h）～25℃（8 h）变温条件有利于杭白芷种子发芽。结论：杭白芷种子发芽的最优条件是：75%乙醇前处理1 min，15℃（16 h）～25℃（8 h）变温条件下，在纸上（BP）发芽床上暗培养。

杭白芷；种子；发芽率

白芷始载于《神农本草经》，为伞形科植物白芷Angelica dahurica（Fisch.ex Hoffm.）Benth.et Hook.f.或杭白芷Angelica dahurica（Fisch.ex Hoffm.）Benth.et Hook.f.var.formosana（Boiss.）Shan et Yuan的干燥根，其性温，味辛，具有解表散寒，祛风止痛，宣通鼻窍，燥湿止带，消肿排脓的功能。应用于感冒头痛，眉棱骨痛，鼻塞流涕，鼻鼽，鼻渊，牙痛，带下，疮疡肿痛［1］。近年来，应用白芷的制剂配合黑光照射治疗白癜风、银屑病也取得了较好效果，同时白芷也成为很好的香料及美容产品在日常生活中广泛使用。

中药杭白芷以种子繁殖为主，但隔年陈种发芽率不高，甚至不发芽，一般不采用［2］，通常选用当年新收的种子。但由于杭白芷种子萌发率低，发芽时间长，使生产、实验受到很大的限制，故认为杭白芷的发芽条件需要进一步的优化，以更有利于杭白芷的规范化生产。

本文采用不同发芽条件处理杭白芷种子，探讨影响杭白芷种子发芽的关键因素，建立杭白芷种子快速发芽和提高种子发芽率的有效方法，为杭白芷的种苗繁育提供参考。现将结果报道如下。

1 材料与仪器

1.1 材料

成熟的杭白芷种子，于2009年9月采自浙江省金华市磐安县尚湖镇种植基地，保存于4℃冰箱。

1.2 仪器及试剂

ZGP-250型光照培养箱（上海精宏实验设备有限公司）；赤霉素（GA，上海伯奥生物科技有限公司）。

2 方法

2.1 种子的前处理

杭白芷种子经过45℃、6 h浸种后，筛选75%乙醇处理1min、2%次氯酸钠溶液中处理15min、沸水处理5 s、10 mg·L－1赤霉素处理10 min、1%甲醛处理1 min和空白处理等6种前处理方法，以空白组为对照，其他条件为25℃恒温，暗培养，TP发芽床。每种前处理方法设3次重复，每次重复50粒种子。

2.2 光照条件的选择

筛选1 000 Lx光照培养和暗培养两种光照条件，其他试验条件为75%乙醇前处理1min，25℃恒温，TP发芽床。每种光照条件设3次重复，每次重复50粒种子。

2.3 发芽床的选择

温度为25℃，75%乙醇浸泡1 min前处理种子后，筛选纸上（TP）、纸间（BP）、砂上（TS）、砂中（S）4种发芽床，暗培养。每种发芽床设3次重复，每次重复50粒种子。

2.4 发芽温度的选择

筛选15，25，30℃3个恒温条件和15℃（16 h）、25℃（8 h），15℃（16 h）、30℃（8 h）两个变温条件，共5个温度处理，其他试验条件为75%乙醇前处理1 min，TP发芽床，25℃恒温，暗培养。每个温度处理设3次重复，每次重复50粒种子。

2.5 数据分析

记录种子发芽始期、播种20 d（初次统计）和40 d（发芽试验终期）的正常发芽种子数。

种子的发芽率按下列公式计算：

发芽率＝规定日期时全部发芽种子粒数/供试种子粒数）×100%。

发芽启动时间为播种到种子开始萌发所需天数；发芽持续时间为种子开始萌发到发芽后连续5 d平均发芽粒数不足供试粒数的1%时所需天数［3］。

统计分析用SPSS 18.0软件包处理，采用单因素方差分析，P＜0.05为统计学检验有显著性差异。

3 结果与分析

3.1 前处理方法对杭白芷种子萌发的影响

结果见表1。

表1 杭白芷前处理试验结果 /%

表1结果显示：75%乙醇浸泡1 min、2%次氯酸钠浸泡15 min、沸水浸泡5 s和1%甲醛浸泡1 min均对杭白芷种子的萌发有影响，其中，75%乙醇浸泡1 min为最佳前处理方法，与其他各试验组比较均有明显差异（P＜0.05）；2%次氯酸钠浸泡15 min和沸水浸泡5 s比较，统计学上无明显差异（P＞0.05）。10 mg·L－1赤霉素浸泡 10 min和空白对照组所得杭白芷种子发芽率为0，表明赤霉素或不做前处理均不利于杭白芷种子的萌发。

3.2 光照对杭白芷种子萌发的影响

黑暗组杭白芷发芽率为18.33%，1 000 Lx光照组的杭白芷发芽率为6.67%，在黑暗的条件下，杭白芷种子的发芽率高，表明黑暗条件更有利于杭白芷种子的萌发。

3.3 发芽床设定对杭白芷种子萌发的影响

结果见表2。

表2 杭白芷发芽床试验结果 /%

从表2可以看出，杭白芷种子在TP发芽床、BP发芽床、TS发芽床和S发芽床两两均比较有明显差异（P＜0.05），其中TP发芽床杭白芷种子的发芽率最高。3.4发芽最适温度对杭白芷种子萌发的影响

结果见表3。

表3 杭白芷发芽温度试验结果 /%

从表3可以看出，杭白芷种子在15～30℃均能萌发，其中15～25℃变温处理时杭白芷的发芽率最高，与其他各试验组比较，均有明显差异（P＜0.05）；25℃和15～30℃变温处理比较，无明显差异（P＞0.05）。30℃处理不利于杭白芷种子的萌发。因此，确定杭白芷种子发芽的最适温度为15～25℃变温。

4 讨论和结论

本实验研究了不同前处理方法对杭白芷种子萌发的影响，试验结果表明，杭白芷种子在经过45℃（6 h）浸种处理后直接进行发芽试验时，杭白芷种子发霉情况严重，因此必须进行前处理。75%乙醇浸泡1 min、2%次氯酸钠浸泡15min、1%甲醛浸泡1min和沸水浸泡5 s 4种前处理方法均有一定的灭菌作用，其中，以75%乙醇浸泡1 min杭白芷的发芽率最高。且此方法较其他3种前处理方法操作简单、精确、残留小，对杭白芷种子的伤害最小。故确定75%乙醇浸泡1 min为杭白芷种子的最佳前处理方法。

试验结果表明，杭白芷种子在15～25℃变温时发芽率最高。温度低于15℃或者高于25℃对杭白芷种子的发芽均有抑制作用，发芽率大幅下降，且变温更有利于杭白芷种子的萌发。这与文献［7］研究杭白芷生长环境的结论基本相符。

杭白芷种子在TP发芽床的发芽率高于其他3种发芽床，故选择TP发芽床为最佳发芽床。适量的水分是保证杭白芷种子发芽的重要条件，接种后在培养皿中加入刚好能充分润湿发芽纸的灭菌水，培养过程中适当加水，以保证杭白芷种子萌发所需水量，提高发芽率。

本研究考察了不同发芽条件对杭白芷种子萌发的影响，建立了75%乙醇浸泡1 min前处理后，播种于TP发芽床的培养皿中，进行夜间15℃（16 h）、白天25℃（8 h）变温，黑暗培养的方法，有利于提高杭白芷种子的发芽率。研究结果对建立杭白芷的种子质量分级标准、制定种子检验规程和杭白芷规范化生产提供了科学依据。

［1］国家药典委员会.中国药典［S］.一部.北京：中国医药科技出版社，2010：97-98.

［2］王爱平.栽培技术［J］.南阳农业科技，2003，（5）：25.

［3］高峰，陈敏，汪付田，等.荆芥及其混淆品的种子比较研究［J］.中国中药杂志，2008，33（5）：577.

［4］苑军，殷霈瑶，李红莉.白芷的生物学特性及规范化栽培技术［J］.中国林副特产，2010，（1）：43-44.

Study on Germ ination Experiments of Angelica Dahurica Seeds

WEN Meng1，SHEN Xiao-xia2，SHEN Yu-feng2，WANG Zhi-an2
（1.Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310053，China；2.Zhejiang Research Institute of Traditional Chinese Medicine，Hangzhou 310023，China）

Objective：To observe the effect of culture condition on the germination of Angelica dahurica seeds.Methods：The effect of pre-treatmentmethods，illumination condition，germination bed and culture temperature on the germination ofAngelica dahuricaseedswas compared.Results：（1）75%ethanol for1min soak is the best pre-treatmentmethods.（2）Dark conditions priming accelerated seeds germination significantly.（3）The germination rate of the seeds onmoist sterile germination special paperwas higher than it on other germination beds.（4）The optimal temperature for the seeds germination was at15℃ （16 hours），during the day and 25℃ （8 hours）.Conclusion：Angelica dahuricacan improve conditions for seed germination rate is 75%ethanol pre-treatment，15～25℃temperature，sterilemoist germination paper in darkness for special.

Angelica dahuricaBenth.；Seeds；Germination rate

国家科技重大专项（2009ZX09308-002）

*沈晓霞，E-mail：xiaoxiashen＠sina.com

2010-12-20）