吴共发张 彦薛小磊赵海燕何 楠韩慧霞＊

(1南方医科大学南方医院病理科;2南方医科大学基础医学院病理学系,广州 510515)

四种防脱载玻片使用效果的比较

吴共发1,2张 彦2薛小磊2赵海燕2何 楠2韩慧霞1,2＊

(1南方医科大学南方医院病理科;2南方医科大学基础医学院病理学系,广州 510515)

免疫组织化学; 脱片

免疫组织化学实验中,由于切片要在试剂中长时间浸泡,尤其是经过微波或高压加热抗原修复处理等操作,极易造成脱片而影响实验进程,这就要求实验前对载玻片进行防脱片处理。本研究旨在从多种硅化方法中探讨一种操作简便,防脱效果好的免疫组织化学实验防脱片处理方法。

材料和方法

1.材料

高品质普通载玻片,3-氨丙基三乙氧基硅烷(3-AMINOPROPYL TRIETHOXY-SILANE,APES)试剂,为美国 Sigma公司产品;各种浓缩型单克隆抗体、即用型二步法免疫组化广谱检测试剂盒和DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司;组织防脱载玻片,购自江苏海门神鹰实验器材厂。

2.方法

2.1 硅化玻片方法 载玻片浸入重铬酸钾硫酸清洁剂过夜,自来水冲洗干净,去离子水过3遍后烤干,进行如下硅化处理。方法Ⅰ:1:50APES无水丙酮液浸泡载玻片约60s,后用无水丙酮浸泡载玻片约60s,最后蒸馏水浸洗1min,通风处晾干装盒备用。方法Ⅱ:1:50APES无水乙醇液浸泡载玻片约60s,后用无水乙醇浸泡载玻片约60s,最后蒸馏水浸洗 1min,通风处晾干装盒备用。方法 Ⅲ:1:50APES蒸馏水溶液浸泡载玻片约60s,蒸馏水浸洗1min,通风处晾干装盒备用。

2.2 免疫组织化学方法及分组 采用SP二步法。……