AccQ·Tag柱前衍生反相-高效液相色谱法测定齿果酸模中的氨基酸含量
2011-10-30高向阳
高向阳,刘 娜
(河南农业大学食品科学技术学院,河南 郑州 450002)
AccQ·Tag柱前衍生反相-高效液相色谱法测定齿果酸模中的氨基酸含量
高向阳,刘 娜
(河南农业大学食品科学技术学院,河南 郑州 450002)
为研究齿果酸模中氨基酸的种类和含量,探讨其营养特性和食用开发价值。以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(AQC)为衍生试剂,以磷酸盐缓冲液为流动相A,乙腈溶液为流动相B进行梯度洗脱;在柱温37℃条件下用AccQ·Tag进行柱前衍生,反相-高效液相色谱法用紫外检测器在波长248nm进行测定。结果表明:齿果酸模中含有17种氨基酸,干基总含量为252.35mg/g,有很好的食用开发前景。17种氨基酸线性回归方程的相关系数r在0.9995以上(n=5),测定的平均回收率为97.1%~102.6%,相对标准偏差RSD为0.3%~3.2%(n=3),测定结果令人满意。
齿果酸模;AccQ·Tag柱前衍生;反相-高效液相色谱法;氨基酸
齿果酸模(Rumex dentatua),为蓼科酸模属,一年或多年生草本,别名牛舌草、土大黄,牛舌棵子、野菠菜等。主要分布在尼泊尔、印度、阿富汗、哈萨克斯坦及欧洲东南部等国家和地区。我国华北、西北、华东、华中等地区齿果酸模自然资源也极为丰富[1],但长期以来,该植物的营养特性和食用价值没有受到人们的关注,未见进行研究、开发和充分利用[2]。
氨基酸是生物体不可缺少的营养成分,对促进人体生长发育具有重要作用,目前,主要采用茚三酮柱后衍生,用氨基酸自动分析仪测定。AccQ·Tag法是一种用于肽及蛋白水解氨基酸分析的柱前衍生新技术,用AQC(6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯)为衍生剂,可与所有含氨基化合物快速定量反应生成高稳定性脲(最大吸收波长为248nm),然后用反相高效液相色谱仪分离衍生产物,用荧光或紫外检测器检测[3]。……
