李康 李柯 陈丹 李若存

刺蓝抗疲劳口服液提取工艺的研究

李康 李柯 陈丹 李若存

目的研究影响刺蓝抗疲劳口服液提取工艺因素，确定最佳条件。方法采用L9(34)进行正交设计试验，对刺蓝抗疲劳口服液提取工艺进行优选，以紫丁香苷、人参皂苷Rb1提取量及浸膏提取率为考察指标，考察加水量、提取时间、药材粒径对提取工艺的影响。结果最佳工艺条件为饮片加水煎煮二次，第一次加10倍水，煎煮2 h，第二次加8倍水，煎煮1.5 h。结论该工艺稳定可靠，简便易行，可用于刺蓝抗疲劳口服液的工业化生产。

刺蓝抗疲劳口服液;正交设计;提取工艺

刺蓝抗疲劳口服液是由刺五加、绞股蓝枸杞子等制成的中药六类新药，功能调补气血，强精神，益气力，用于术后疲劳综合征。证属气血亏虚者。为了提高药材中有效物质的利用率，我们根据处方有效成分的性质，采用正交试验对刺蓝抗疲劳口服液的提取工艺进行了研究。

1 仪器与试液

LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津)，N2000色谱工作站(浙江大学智能信息工程研究所)，PBQ-Ⅱ型薄层自动铺板器(重庆南岸新力实验电器厂)，硅胶G(青岛海洋化工厂)，AE-240型电子分析天平(中国梅特勒-托利多仪器厂);刺五加、绞股蓝等药材购自长沙九旺医药有限公司，紫丁香苷、人参皂苷Rb1均由中国药品生物制品检定所提供，所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 因素水平表

表1 试验因素水平表

2.2试验方法与结果

表2 L9(34)正交实验设计表

2.2.1 浸膏得率的测定 用L9(34)正交表安排试验，见表2，称取1/10处方量药材，按设定方案进行提取，滤过，滤液合并，浓缩，定容至100 ml。精密吸取10 ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷却0.5 h，迅速称重，按下式计算浸膏得率，计算结果见表3。

2.2.2 紫丁香苷含量测定［1］

2.2.2.1 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水(13∶87)为流动相;检测波长为265nm;理论板数按紫丁香苷峰计算不得低于2000。

对照品溶液的制备精密称取紫丁香苷对照品适量，加甲醇制成每1 ml含0.1 mg的溶液，即得。

表3 浸膏得率的测定结果(%)

2.2.2.2 供试品溶液的制备 取(2.1)项下已定容的9份余液，分别精密量取2 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45 μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。共制得9个样品。

2.2.2.3 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10 μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。结果见表4。

2.2.3 人参皂苷Rb1含量的测定

2.2.3.1 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-0.5%磷酸(20∶80)为流动相;检测波长为203nm;理论板数按人参皂苷Rb1峰计算不得低于2000。

2.2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇制成每1 ml含0.1 mg的溶液，即得。

2.2.3.3 供试品溶液的制备 取紫丁香苷含量测定项下的供试品作为供试品。

2.2.3.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10 μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。结果见表5。

表4 紫丁香苷提取量(mg)

表5 人参皂苷Rb1提取量(mg)

表6 浸膏提取率方差分析表

以浸膏得率为考察指标，表中极差R值大小显示，各因素作用主次为B＞A＞C;B1＞B2＞B3，A2＞A3＞A1，C2＞C1＞ C3;方差分析结果表明:B因素有非常显著性意义(P＜0.01)，A因素有显著性意义(P＜0.05)，以B1A2C2组合为佳。

以紫丁香苷提取量为考察指标，表中极差R值大小显示，各因素作用主次为A＞B＞C，且A1＞A2＞A3，B1＞B2＞B3，C2＞C1＞C3;方差分析结果表明:A因素有非常显著性意义(P＜0.01)，B因素有显著性意义(P＜0.05)，以A1B1C2组合为佳。

表7 紫丁香苷提取量方差分析表

表8 人参皂苷Rb1提取量方差分析表

以人参皂苷Rb1提取量为考察指标，表中极差R值大小显示，各因素作用主次为A＞B＞C，且A1＞A2＞A3，B1＞B2＞B3，C3＞C1＞C2;方差分析结果表明:A、B因素有显著性意义(P＜0.05)，以A1B1C1组合为佳。

综合以上实验结果表明，加水量、提取时间对提取效果具有显著性影响，药材粒径对提取效果无显著性影响，本产品中紫丁香苷提取量及人参皂苷提取量作为重要因素考虑，因此以A1B1C1为最佳组合。

2.3 验证试验 平行称取同一批1/10处方量药材3份，按A1B1C1进行试验，结果见表9。

表9 验证试验结果

根据上述验证实验结果，故确定最佳工艺条件为A1B1C1，即取饮片加水煎煮2次，第一次加10倍量水，煎煮2 h，第二次加8倍量水，煎煮1.5 h。

3 讨论

3.1 刺五加具有益气健脾，补气安神的功能，为方中君药，药理和临床研究结果表明:刺五加中所含的总苷是抗疲劳、扶正固本的有效成分［2］;绞股蓝所含的绞股蓝总苷是抗疲劳、防治多脏器损伤的有效成分［3］;上述成分水溶性好，因此选择水作为本制剂的提取溶剂。

3.2 本试验以刺五加中含的紫丁香苷，绞股蓝中含的人参皂苷Rb1及浸膏提取率作为评价指标，通过正交试验法对刺蓝抗疲劳口服液的提取工艺条件进行了优化，并按最佳工艺进行了验证，结果表明该工艺重复性好，有效组分提取效率高，且经济可行。本研究为刺蓝抗疲劳口服液的生产工艺提供了合理依据。

［1］ 中国药典委员咐．中华人民共和国药典．一部.北京．中国医药科技出版社，2010:192．

［2］ 郭爱民.刺五加的现代研究进展.中国现代药物应用，2009，3 (10):194．

［3］ 孙万森，齐典．绞股蓝总苷防治多脏器损伤的药理研究进展.中药材，2007，30(2):241．

Study on the extraction process in Cilan Kanpilao oral liquid

LI Kang，LI Ke，CHEN Dan，et al．
The First Affiliated Hospital in Hunan University of Traditional Medicine Changsha 410007，China

Objective To study the factor which has effect on the extraction of Cilan Kanpilao oral liquid，select the best process.MethodsThe extracting conditions were optimized by using L9(34)orthogonal test.Employing the content of Syringin，Ginsenoside Rb1and the extraction ratio of extractum as indexes，the effects of the grain size of crude drugs，time andcycles of extracting，the amount of water on the extracting process were investigated.ResultsThe optimal conditions were process herbs，10 times and 8 times amount of water for 2 cycles，and the extracting time was 2 hours and 1.5 hours in each time.ConclusionThe process is stable and repiable，easy and available，suitable for manufacturing of Cilan Kanpilao oral liquid．

Cilan Kanpilao oral liquid;Orthogonal design;Extracting process

湖南省科技厅科研基金资助项目(项目编号: 2010FJ3105)

410007 湖南中医药大学附属第一医院(李康);湖南省中医药研究院(李柯 陈丹 李若存)

李若存 E-mail:liruocun2003@yahoo.com.cn