高游离脂肪酸通过FOXO1途径抑制内皮祖细胞增殖并促进其凋亡*
2011-10-24王红祥张文静
陈 莉, 王红祥, 赵 湜, 李 娜, 张文静, 丁 胜
(武汉市中心医院内分泌科,湖北 武汉 430014)
高游离脂肪酸通过FOXO1途径抑制内皮祖细胞增殖并促进其凋亡*
陈 莉, 王红祥△, 赵 湜, 李 娜, 张文静, 丁 胜
(武汉市中心医院内分泌科,湖北 武汉 430014)
目的研究高游离脂肪酸(FFA)对糖尿病患者内皮祖细胞(EPCs)增殖及凋亡的影响,评价FFA在糖尿病血管并发症中的可能作用。方法分离培养2型糖尿病患者EPCs(DM组)和正常对照组EPCs(对照组),加入不同浓度(0、10和50 mmol/L)的FFA。MTT法检测EPCs增殖,Annexin-V/PI法检测其凋亡。RT-PCR法和Western blotting法检测核转录因子FOXO1的表达水平。结果随着FFA浓度的增加,DM组和对照组EPCs增殖率明显下降,而凋亡率明显增加,差异均显著(P<0.05)。相同FFA浓度下,DM组增殖率低于对照组(P<0.05)。随着FFA浓度的增加,DM组和对照组FOXO1的mRNA表达逐渐降低,差异显著(P<0.05)。结论高FFA可能通过FOXO1途径抑制EPCs增殖并诱导其凋亡,可能在糖尿病血管并发症的发生中发挥作用。
游离脂肪酸; 内皮祖细胞; 细胞增殖; 细胞凋亡; 叉头框O1蛋白
糖尿病是一种以高血糖为主要特征的代谢综合征。血管并发症是糖尿病的主要并发症之一,严重影响了糖尿病患者的生活质量,其发生与血管内皮细胞及其前体细胞内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)相关。高游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)作为糖尿病血管并发症发生中的重要环节,对血管内皮细胞的作用已经有较多研究,但其对EPCs的影响及其机制均不清楚。为此,本研究将FFA作用于EPCs,观察其增殖及凋亡的变化,并检测核转录因子叉头框O1(forkhead box O1,FOXO1)蛋白的表达,以进一步了解糖尿病血管并发症中FFA所起的作用,为其防治提供实验依据。
材 料 和 方 法
1材料
M199培养基和胎牛血清购自Gibco。牛血清白蛋白(bouvine serum albumin, BSA)和叠氮化钠购自Sigma。25 cm2培养瓶及各种培养板、离心管均购自Corning。MTT购自华美生物工程公司。胰蛋白酶购自上海生工生物工程公司。……
