王甘露,姜汉国,黄 婷,贺 德,侍立志,陈 晖

(1.深圳市宝安区人民医院 外一科,广东深圳518101;2.广东医学院病理教研室,广东湛江524023)

近二十多年分子生物学的研究表明肿瘤的发生发展与肿瘤细胞的跨膜信息传递机制密切相关。目前,许多学者发现PI3K/AKT(磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸激酶)信号传导通路异常改变与人类一些恶性肿瘤发生发展密切相关[1-5]。胆囊腺癌是较少见的一类恶性肿瘤,多见于60岁以上的女性,早期诊断困难;一旦临床确诊,绝大多数已发生浸润和转移,预后差。有关胆囊腺癌转移的机制目前尚不清楚,为探索PI3K/AKT信号传导通路异常是否与其发生发展相关,本研究应用免疫组化法检测临床46例胆囊腺癌组织中pAKT、VEGF的表达及其微血管密度(MVD)和微淋巴管密度(MLD),旨在探讨它们对胆囊腺癌发生发展的影响。

1 资料与方法

1.1 标本来源 选取复旦大学附属中山医院和广东医学院附属医院2003年1月至2008年12月资料完整的46例胆囊腺癌根治术标本,患者术前均未经过任何抗肿瘤治疗。46例中男11例,女35例,中位年龄62岁;有淋巴结转移17例,无淋巴结转移29例。另选取胆囊腺瘤和慢性胆囊炎各10例作为对照组。全部标本经10%中性甲醛液固定,石蜡包埋,5 μ m厚连续切片待测。

1.2 方法

1.2.1 HE染色 常规HE染色,胆囊腺癌分别按WHO分型及有无淋巴结转移进行分组。

1.2.2 免疫组织化学染色 免疫组化按SP试剂盒说明书步骤操作。由试剂公司提供的乳腺癌pAKT和VEGF阳性切片为阳性对照,PBS代替1抗作为空白对照。抗CD34、CD31和D2-40单克隆抗体及免疫组织化学试剂盒均购于北京中杉金桥生物技术有限公司,pAKT(S473)和VEGF多克隆抗体购自Cell Signaling公司。……