郝静娜 郭书萍

大疱性类天疱疮是一种获得性自身免疫性大疱性皮肤病，其发病机制尚未清楚。本研究采用免疫组织化学技术法对大疱性类天疱疮病例组中IL-5和IL-17细胞因子进行检测，完善对大疱性类天疱疮发病机制的认识，有利于大疱性类天疱疮的治疗。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2008年1月至2010年12月在我院皮肤科就诊的患者，大疱性类天疱疮病例组38例，其中男18例，女20例，年龄60～82岁，平均73.4岁;对照组20例均是来自我院整形科和普外科的正常人，其中男12例，女9例，年龄58～76岁，平均66.5岁，无任何皮肤病及系统性疾病。

1.2主要试剂 兔抗人白介素5(IL-5)多克隆抗体、兔抗人白介素17(IL-17)多克隆抗体、多聚体抗兔IGG-HRP二抗试剂盒均由武汉博士德公司提供。

1.3方法 ①切片脱蜡至水。②3%H2O2室温10 min以灭活内源性酶。蒸馏水洗2 min 3次。③对抗原进行枸橼酸钠热修复。④滴加封闭液，室温放置10 min。甩去多余的液体，不洗。⑤滴加一抗，37℃孵育2 h。⑥滴加聚合HRP标记抗兔IgG，37℃孵育30 min，PBS冲洗5 min 3次。⑦DAB显色，苏木素复染，乙醇脱水，二甲苯透明，封片。

1.4结果判定 IL-5免疫组织化学结果以细胞浆有棕黄色颗粒为阳性，IL-17免疫组织化学结果以细胞浆和(或)细胞核有棕黄色颗粒为阳性，每张切片随机选取5个视野，利用MIAS-2000图像分析系统分析阳性区域积分光密度值(IOD值)，以IOD值的大小代表阳性产物表达的多少。

1.5统计学方法 两组间比较采用t检验，两指标间相关性采用Pearson相关分析。所有统计学资料采用 SPSS 13．0统计软件分析，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

大疱性类天疱疮皮损中IL-5的阳性表达主要分布于表皮全层尤其以基底层为主，IL-17阳性表达分布于表皮全层;而在正常皮肤组织中均称阴性或弱阳性表达。……