邢 影， 张文杰， 方 芳， 郑昭石

(1吉林大学中日联谊医院神经内科，吉林长春130033;2吉林大学白求恩医学部生理教研室，吉林长春130021)

脑缺血损伤机制之一是细胞内钙超载，研究表明引起细胞内钙超载的原因除细胞本身的变化外，还有电压门控性钙通道和N－甲基－D－天冬氨酸受体(N－methyl－D－aspartate receptor，NMDAR)依赖性钙通道的参与[1，2]，然而对NMDAR拮抗剂的脑保护作用研究不尽人意[3]，使学者们的视线重新回到电压门控性钙通道和寻找其它类型的离子通道上。糖尿病是脑梗死独立的危险因素之一。糖尿病基础上的脑梗死症状重、多进展，预后差，但其确切机制尚不清楚，目前相关研究较少。本研究从离子通道角度研究糖尿病加重脑梗死的可能机制，对进一步加深糖尿病合并脑梗死的认识及进一步有效地干预具有重要意义。

材料和方法

1 动物、分组及主要试剂

雄性Wistar大鼠50只，体重220－240 g，由吉林大学基础医学院动物实验中心提供。

1.1 分组 糖尿病组25只，正常组25只;根据局灶性脑缺血时间分为正常假手术组和单纯缺血1 h、3 h、6 h、24 h组，每组5只;糖尿病假手术组和糖尿病局灶性缺血1 h、3 h、6 h、24 h 组，每组 5 只;共 10组。

1.2 主要试剂 链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)和链霉蛋白酶(pronase)购自Sigma，人工脑脊液及记录钙通道电流的细胞内、外液为自配。

2 模型建立

2.1 糖尿病大鼠模型建立 高脂饮食4周后，参考文献[4]并按照试剂说明，制备pH=4.2的柠檬酸缓冲液。按30 mg/kg称取STZ，溶于柠檬酸缓冲液中，快速腹腔注射。7 d后尾静脉取血，测空腹血糖≥16.7 mmol/L为造模成功。血糖高于30 mmol/L剔除实验，随机补充。

2.2 局灶脑缺血(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型的建立 MCAO模型以 Zea－Longa等[5]法为标准，选用尼龙线栓塞左侧大脑中动脉。……