廖紫薇， 邓红霞， 张国平， 周 辉， 郭俊明

(宁波大学医学院生化教研室，浙江宁波315211)

全球每年死于癌症的人数约为700万，其中因患胃癌死亡的人数比例约为十分之一;而在包括我国在内的一些亚洲国家，胃癌的死亡率位居各种癌症的首位[1]。虽然胃癌的诊治技术发展很快，但人们对其发生机制尚未完全明了。

微小RNA(microRNA，miRNA)是一类长度约为22个核苷酸的非编码RNA分子。它们通过抑制翻译或导致mRNA降解来发挥调节基因表达的作用[2]。miRNA具有多样的生物学功能，因而受到人们的广泛关注[3]。越来越多的研究证明miRNA与肿瘤形成有密切关系，这使之成为肿瘤病理生理学研究领域的重点之一[1]。本课题组在前期研究中发现，miR－106a在胃癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织[3]。采用miR－106a抑制剂能有效抑制胃癌细胞的增殖[4]。这些结果提示，miR－106a与胃癌发生的关系非常密切。为进一步明确miR－106a的致癌特性，本研究通过转染miR－106a类似物到正常胃黏膜上皮细胞内以提高细胞内miR－106a的水平，然后观察其对正常细胞增殖的影响;另外，研究miR－106a抑制剂抑制胃癌细胞生长的机制并观察裸鼠胃癌移植瘤的生长变化。

材料和方法

1 材料

1.1 主要试剂 人正常胃黏膜上皮细胞GES－1、胃癌MGC－803和SGC－7901细胞购自中国科学院上海细胞库。高糖型Dulbecco改进的Eagle培养液(Dulbecco's modified eagle medium，DMEM)购自美国生命技术公司。Lipofectamine 2000转染试剂购自Invitrogen。特级胎牛血清购于杭州四季青生物制品公司，使用前56℃水浴30 min灭活补体后分装，－20℃保存。二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)购于上海生工生物工程公司。miR－106a类似物(双链)购自上海吉玛制药技术有限公司，其序列为:5'－ AAAAGUGCUUACAGUGCAGGUAG －3'，5'－ ACCUGCACUGCAAGCACUUUUUU －3'。……