刘玉晖， 游 宇

(1江西中医学院药学院药理学教研室，江西南昌330004;2南昌大学附属第一医院消化内科，江西南昌330006)

流行病学研究证明，高同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)血症是人类许多疾病的独立危险因素，如冠状动脉粥样硬化性心脏病、脑中风、外周血管栓塞性疾病等[1，2]。正常情况下，Hcy在甲硫氨酸合酶或甜菜碱－Hcy甲基转移酶作用下，转变为甲硫氨酸，或在胱硫醚 β－合成酶(cystathionine β－synthetase)和维生素B6作用下，通过转硫过程分解为胱硫醚，继而转变为半胱氨酸。如果遗传性地缺少关键酶以及维生素B12等维生素时，Hcy不能进行正常的转化与代谢，而是在氨酰基tRNA合成酶(aminoacyl－tRNA synthetases，AARSs)作用下，进行分子内的反应，Hcy侧链的巯基与羧基反应，形成Hcy硫内酯 (homocysteine thiolactone，HTL)[3]。 目 前 对 于HTL引起细胞损伤的机制尚不清楚，推测可能与诱导活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)的形成有关。血管内皮细胞(endothelial cells，ECs)不仅是血液与血管平滑肌之间的生理屏障，也是一个高度活跃的代谢库，它可以合成多种活性物质，如一氧化氮(nitro oxide，NO)、内皮素、缓激肽等，在调节血管的舒缩活动与血液的流动性方面起着十分重要的作用[4]。高Hcy血症可引起血管功能损伤和动脉粥样硬化的发生，Hcy的致病作用主要与Hcy在体内生成了HTL有关。本实验利用培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)模型，观察HTL对内皮细胞的直接损伤作用，旨在从细胞和分子水平探讨HTL损伤内皮细胞的机制，寻找其干预靶点，探索治疗途径。

材料和方法

1 试剂与仪器

HTL、NADPH氧化酶抑制剂夹竹桃麻素(apocynin，Apo)、NF－κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)、胰蛋白酶和 DMSO(Sigma)。DMEM培养基(Gibco)。……