袁文泽 ，贾 赟 ，蔡晓萍 ，肇慧君 ，孙艳峰 ，简中友 ，胡传伟 ，吴 斌

（1. 辽宁出入境检验检疫局， 辽宁大连 116001；2. 大连机场出入境检验检疫局，辽宁大连 116001）

为了明确野生候鸟是否是引起家禽爆发禽流感的直接原因，我们希望能够在中国辽宁境内边境地区迁徙侯鸟的禽流感病毒流行病学方面获得更多的信息。为此，本研究对2009—2010年辽宁境内边境地区迁徙的野生侯鸟进行了流感病毒的流行病学分析。

1 实验材料

1.1 检测样本收集

从2009年1月到2010年12月，我们根据野生候鸟的迁徙时间和路线，在春秋两季分别在辽宁省的大连、丹东、东港、营口、葫芦岛、锦州、盘锦等七个城市的野生候鸟聚居地（包括池塘、湖泊、海边以及经济生产禽类附近的水禽管理区城），共采集了野生候鸟和水禽的血清样品和拭子样品，其中白鹭血清共80份，拭子样品840份。

1.2 标准抗原和其他诊断试剂

各亚型禽流感病毒标准抗原H5、H7、H9亚型均购自中国农科院哈尔滨兽医研究所国家禽流感诊断实验室。禽流感病毒通用型荧光RT-PCR试剂盒和H5、H7、H9亚型禽流感病毒荧光RT-PCR试剂盒为深圳匹基生物科技公司产品。

2 实验方法

2.1 血凝抑制试验（HI）

HI实验按照国家标准：高致病性禽流感诊断技术（GB/T 18936-2003）规定的操作方法进行。

2.2 病原检测（采用禽流感病毒荧光RT-PCR方法）

按照GB/T18936-2003规定的荧光RT-PCR方法操作规程对离心后的拭子样品进行检验。

3 实验结果

3.1 迁徙候鸟类和水禽禽流感病毒的血清学调查

运用HI方法总共检测了80份血清样本的禽流感抗体水平，根据OIE建议的禽流感抗体阳性标准（HI抗体≥41og2），所检测的血清样本对H5、H7、H9等亚型都呈阴性（表1）。……