鸡胚致病性大肠杆菌的分离与鉴定
2011-08-16刘国庆温建新赵鹏伟李倩倩
中国动物检疫 2011年10期
刘国庆,温建新,赵鹏伟,李倩倩,刘 坤
(1.胶南市动物疾病控制中心,山东青岛 266400;2.青岛农业大学动物科技学院,山东青岛 266109;3.中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛 266032)
2011年4月,在胶州某种鸡场19日龄鸡胚死亡数量增加,经剖检时可见卵黄吸收不良,大多为黄绿色物质,肝脏肿大出血,经过分离培养、生化试验和溶血试验确诊为致病性大肠杆菌,通过药敏试验检测了病原菌对药物的敏感性,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 病料来源 胶州某种鸡场的一批待检的19日龄病死鸡胚。
1.1.2 试验材料 普通营养琼脂培养基、肉汤培养基、伊红美蓝培养基(EMB)、三糖铁培养基(TSI)、用兔血配制的血平板培养基、柠檬酸盐琼脂、葡萄糖蛋白胨水;五糖发酵管(葡、麦、蔗、乳、甘)、H2S、靛基质、MR试剂、VP试剂、吲哚试剂、药敏纸片(购自杭州天和微生物试剂有限公司);E.coli标准“O”血清、标准菌株均购自中国兽医药品监察所。
1.2 方法
1.2.1 病理剖检 随机抽取42只鸡胚,观察尿囊液的变化及内脏的病理变化。
1.2.2 细菌的分离、纯化及形态学观察 将病料分别无菌接种到肉汤培养基上,37 ℃培养24 h后,用灭菌环挑去肉汤中的培养物分别接种到EMB培养基上,37 ℃培养24 h。挑去EMB培养基上的单个菌落进行革兰氏染色,镜检。
1.2.3 生化试验 挑取在经革兰氏染色后呈阴性短杆菌的EMB黑色带有在金属光泽菌落在普通营养琼脂培养基上进行纯化培养后,按照常规方法进行TSI、糖发酵试验[1]、IMViC。
1.2.4 溶血性试验 从EMB培养基中挑取单个菌落接种到兔血配制的血平板上,置于37 ℃培养24 h,观察培养基中是否产生溶血现象。……
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