智新慧

医院感染是指住院患者住院期间发生的感染以及在医院内获得出院后发生的感染，现代医疗技术发展增加了侵入性操作、抗生素使用、放疗化疗、免疫抑制剂推广等，均可能致使医院感染问题加重，导致临床耐药菌株增加[1]。由于医生使用抗生素治疗感染时全凭经验，存在盲目性，导致更多耐药菌株产生。为此，本文旨在对2009年10月～2010年6月住院患者的标本进行病原菌种类分布、菌株耐药性分析，以期达到提高抗生素合理使用水平的目的，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象

2009年10月～2010年6月住院患者的660份常规送检标本，包括患者的痰液、中段尿、伤口分泌物、粪便、胸腹水、胆汁等各类送检标本，排除同一患者的相同部位重复菌株，共分离出病菌457株。

1.2 质控菌株

本试验选用的质控菌株来自卫生部的临床检验中心，菌株包括：大肠埃希菌ATCC 25922、金葡菌ATCC 25923、白色假丝酵母菌ATCC 90029、铜绿假单胞菌ATCC 27853。

1.3 实验仪器和试剂

包括K-B纸片、ATB全自动微生物药敏鉴定分析仪、哥伦比亚琼脂、药敏板、鉴定板及相关配套试剂等。

1.4 实验方法

1.4.1 标本检测

送检标本的细菌分离培养均严格按照《全国临床检验操作规程》（第3版）进行，将检出的细菌作革兰染色、生化反应鉴定，得出菌种分离鉴定结果。

1.4.2 药敏实验

采用K-B纸片琼脂扩散法、稀释法（包括肉汤稀释法和琼脂稀释法）、E试验法、仪器法进行定性定量检测细菌是否对药物耐药[2]。

1.4.3 耐药菌的检测方法

上述鉴定筛选出MRS及ESBLs菌株，按CLSI2005年版本所推荐的方法，使用头孢西丁纸片确证葡萄球菌属的MRS；采用双纸片协同法对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株进行确证[3]。肠球菌中的高耐药菌株对高浓度庆大霉纸片(120μg/m)的抑菌直径圈≤6mm可判为耐药，抑菌圈直径7～9mm时,应进一步用肉汤稀释法测MIC以确证。肺炎链球菌检测采用1μg苯唑青霉素纸片，抑菌圈直径＞20mm提示对青霉素G敏感,如抑菌圈直径＜19mm，提示该菌对青霉素耐药或中度敏感,需用稀释法进一步确证。测试ESBLs采用双纸片协同试验，β-内酰胺内酶监测采用产色头孢菌素法、碘-淀粉测定法。

2 结果

2.1 病原菌检出

共分离出457株病原菌，革兰氏阴性杆菌278株（60.8%），革兰氏阳性菌116株（25.4%），真菌63株（13.8%）；G-菌中以铜绿假单胞菌居首位，G+菌以葡萄球菌为主，63株真菌中白色假丝酵母菌共41株（9.0%）。G-菌及G+菌检出见表1。

表1 检出G-菌及G+菌情况[n(%)]

2.2 药敏试验及耐药性结果

2.2.1 药敏试验

G+球菌对各种常用抗菌药物的耐药率普遍＞50%，金葡菌对青霉素耐药达100.0%，G+球菌仅对万古霉素较为敏感；革兰阴性杆菌对各种抗菌药物的抗药程度不等，对亚胺培南、阿米卡星较为敏感。

2.2.2 耐药情况

①革兰阴性菌的耐药情况见表2；②革兰氏阳性菌中对各种常用抗菌药物的耐药率见表3；③真菌耐药率：真菌中占首位的白色假丝酵母菌对常用抗真菌药保持较高的敏感性。

表2 革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率分布（%）

表3 G+菌对抗菌药物的耐药率（%）

3 讨论

本次调查院内感染的致病菌种类主要以革兰氏阴性菌为主，其次为革兰阳性菌及白色假丝菌属，与国内相关报道结果基本一致[4]。在所有检出的病原菌中，铜绿假单胞菌位居首位，占所有检出病菌的12.5%，对多种常用抗菌药物的耐药率达50.0%以上，临床医生不合理的单药应用是导致泛耐药铜绿假单胞菌的根本原因。

本次调查结果显示，本院发生的医院感染中，各种致病菌对常用抗菌药物的耐药率不容乐观，抗菌药物的临床使用情况有待改善。革兰阴性菌对阿米卡星、环丙沙星、亚胺培南有较高敏感性，大多数革兰阳性菌对哌拉西林、氨苄西林耐药率达80.0%以上。革兰氏阳性菌中的金葡菌对青霉素、红霉素、氨苄西林的耐药率分别达到100.0%、89.2%、93.4%，其他葡萄球菌对青霉素、红霉素、氨苄西林、苯唑西林也达到80.0%以上，此外，金黄色葡萄球菌对除了万古霉素、阿米卡星、氯霉素以外的其他抗菌药物均显示高耐药性（＞50.0%）。根据药敏试验结果，建议慎重使用万古霉素、阿米卡星为预防性用药, 以保护其敏感性。

致病菌产生耐药菌株，与临床医生的不规范使用抗菌药物有关。医院感染治疗时,建议对感染病人的标本进行细菌培养、药敏实验，根据结果适当选用抗菌药物，可减缓耐药菌的产生。

[1] 梁学柱.医院感染病原菌的构成及耐药性分析[J].安庆医学，2007,28（2）：39-41.

[2] 张卫华.细菌耐药机理及其耐药细菌的检测与临床[M].中国社区医师医学专业，2010,(35),12:151.

[3] 杨秀云，和建波，等.医院感染病原菌的临床分布特征及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2010,20（9）：1313-1315.

[4] 邱菊红，何贵元,周成芳.临床常见医院感染病原菌及耐药性观察[J].中国消毒学杂志，2011,28（1）：45-47.