陈治芳， 王文桥， 韩秀英， 张小风， 赵建江， 马志强

（1.河北农业大学植物保护学院农药系，保定 071001；2.河北省农林科学院植物保护研究所／河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心，保定 071000）

新杀菌剂对番茄灰霉病菌的室内毒力及田间防效

陈治芳1，2， 王文桥2＊， 韩秀英2， 张小风2， 赵建江2， 马志强2

（1.河北农业大学植物保护学院农药系，保定 071001；2.河北省农林科学院植物保护研究所／河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心，保定 071000）

室内采用菌丝生长速率法、孢子萌发法和黄瓜子叶法测定了咯菌腈、抑霉唑、福美双、吡唑醚菌酯和嘧霉胺对番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）的抑制作用。结果表明，菌丝生长速率法和孢子萌发法的测定均以咯菌腈毒力最高，EC50分别为0.005 2μg／mL和0.087 6μg／mL；黄瓜子叶法测定以抑霉唑毒力最高，其EC50为0.675 3μg／mL。田间药效试验结果表明：50%咯菌腈可湿性粉剂90g／hm2对番茄灰霉病的田间防效达到90%以上，显著高于对照药剂50%啶酰菌胺水分散粒剂300g／hm2和40%嘧霉胺悬浮剂480g／hm2的防效。

黄瓜子叶法； 杀菌剂； 番茄灰霉病菌； 毒力； 田间药效试验

番茄灰霉病是由灰葡萄孢（Botrytis cinereaPersex Fr.）引起的一种世界性病害。在我国北方保护地中因灰霉病造成番茄平均减产20%～40%，严重可达60%以上［1］。番茄灰霉病以化学防治为主要防治手段。目前，苯并咪唑类、二甲酰亚胺类和苯胺基嘧啶类等常用杀菌剂对灰霉病的防治效果均因灰霉病菌抗药性的产生而大大降低［2－4］，生产中亟需筛选新的有效防治药剂。咯菌腈（fludioxonil）、抑霉唑（imazalil）、吡唑醚菌酯（pyraclostrobin）和福美双（thiram）等杀菌剂对灰霉病菌作用机制特异，与苯并咪唑类、二甲酰亚胺类和苯胺基嘧啶类等常用杀菌剂之间无交互抗性关系。为此，本研究采用黄瓜子叶法测定了嘧霉胺（pyrimethanil）、咯菌腈、抑霉唑、吡唑醚菌酯和福美双等5种杀菌剂对番茄灰霉病菌的室内毒力，并进行了咯菌腈、啶酰菌胺和嘧霉胺的田间药效试验，旨在为选择有效控制田间番茄灰霉病的杀菌剂提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试菌株

番茄灰霉菌菌株（DLX2），2009年采自河北省定州市赵村乡西甘德村，经分离、纯化后保存在试管培养基上。

1.1.2 供试品种

在温室花盆中装入蛭石，播种黄瓜（品种为‘新泰密刺’），1粒∕盆，子叶充分展开后选择长势一致的幼苗子叶备用。

1.1.3 供试药剂

98%福美双原药，河北冠龙农化有限公司；50%福美双可湿性粉剂，河北冠龙农化有限公司；98%抑霉唑原药，浙江一帆化工有限公司；22.2%抑霉唑乳油，美国仙农有限公司；99%咯菌腈原药，沈阳化工研究院；50%咯菌腈可湿性粉剂，先正达（中国）投资有限公司；95%吡唑醚菌酯原药、25%吡唑醚菌酯乳油，巴斯夫欧洲公司；95%嘧霉胺原药，河北冠龙农药有限公司；40%嘧霉胺悬浮剂，德国拜耳有限公司；50%啶酰菌胺水分散粒剂，巴斯夫（中国）有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 室内毒力测定

采用菌丝生长速率法［5］和孢子萌发法［6］使用供试原药、黄瓜子叶法［7］使用供试制剂分别测定了咯菌腈、抑霉唑、吡唑醚菌酯、福美双和嘧霉胺等5种杀菌剂对番茄灰霉病菌的室内毒力。

1.2.2 田间药效试验

2010年4－5月在河北徐水县田村铺村进行田间防治番茄灰霉病的药效试验。番茄品种 ‘东胜太保’。处理及有效成分剂量见表4，另设清水对照。采用随机区组排列，4次重复，每小区面积24m2。

初见番茄灰霉病斑开始用药（2010年4月16日），用背负式手动喷雾器喷药，用药液量为900L／hm2，共用药2次。末次用药后7d调查。每小区随机取4点调查，每点调查2株，每株调查全部果实，记录病果个数。病果分级采用如下标准。

0级：无病斑；

1级：残留花瓣发病或柱头发病；

3级：萼片腐烂或柱头发病蔓延到果脐部；

5级：果脐部有浸润斑但无霉层；

7级：果脐部有霉层但未扩展到其他部位；

9级：果脐部霉层扩展到其他部位。

药效计算方法：

2 结果与分析

2.1 室内毒力测定结果

从表1可以看出，5种杀菌剂中，咯菌腈对番茄灰霉病菌菌丝生长的抑制作用最强，EC50为0.005 2μg／mL；其次是抑霉唑，EC50为2.664 5μg／mL；福美双、吡唑醚菌酯和嘧霉胺EC50分别为17.791 5、41.505 1μg／mL和78.861 7μg／mL。毒力最强的是咯菌腈。

表1 菌丝生长速率法测定5种杀菌剂对番茄灰霉病菌的室内毒力

孢子萌发法测定6种杀菌剂对番茄灰霉病菌的室内毒力结果（表2）表明：咯菌腈对番茄灰霉病菌分生孢子萌发的抑制作用最强，EC50为0.087 6μg／mL；其次是吡唑醚菌酯，EC50为0.135 8μg／mL；福美双EC50为0.569 0μg／mL；抑霉唑和嘧霉胺EC50分别为1.073 8和5.418 6μg／mL。毒力最强的是咯菌腈。

由表3可见，活体测定的5种杀菌剂中，抑霉唑对番茄灰霉病菌侵染黄瓜子叶的抑制作用最强，其EC50为 0.675 3μg／mL；其次是福美双，EC50为0.689 4μg／mL；咯菌腈 EC50为1.274 0μg／mL；吡唑醚菌酯EC50为198.76μg／mL；嘧霉胺的EC50为235.88μg／mL。抑霉唑毒力最强，嘧霉胺毒力最小。

表2 孢子萌发法测定5种杀菌剂对番茄灰霉病菌的室内毒力

表3 黄瓜子叶法测定5种杀菌剂对番茄灰霉病菌的室内毒力

2.2 田间药效试验结果

田间药效试验结果（表4）表明：50%咯菌腈可湿性粉剂、50%啶酰菌胺水分散粒剂和40%嘧霉胺悬浮剂对番茄灰霉病的防效分别为74.46%～90.86%，68.80%～85.34%和52.39%。50%咯菌腈可湿性粉剂45、60g／hm2和90g／hm2的防效分别高于50%啶酰菌胺水分散粒剂150、200g／hm2和300g／hm2的防效；50%咯菌腈可湿性粉剂与50%啶酰菌胺水分散粒剂的防效均高于40%嘧霉胺悬浮剂（480g／hm2）的防效。50%咯菌腈可湿性粉剂90g／hm2的防效最好。各供试制剂按推荐用量使用对作物安全。

表4 咯菌腈和嘧霉胺对番茄灰霉病的田间防治效果1）

3 结论与讨论

室内试验结果表明：采用菌丝生长速率法、孢子萌发法和黄瓜子叶法分别测定了5种杀菌剂对番茄灰霉病菌的毒力，发现咯菌腈对番茄灰霉病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用均最强，抑霉唑次之。活体测定结果表明抑霉唑的抑制作用最强，其次是福美双，两者抑制番茄灰霉病菌的有效中浓度均小于1μg／mL；咯菌腈也有较强的抑制作用，有效抑制中浓度小于5μg／mL；但是吡唑醚菌酯和嘧霉胺抑菌作用很差，有效中浓度均大于100μg／mL。

田间药效试验结果表明：50%咯菌腈可湿性粉剂（90g／hm2）在用药后7d对番茄灰霉病的防效最高，达90%以上，高于50%啶酰菌胺水分散粒剂（300g／hm2）和40%嘧霉胺悬浮剂的防效。在推荐浓度下使用均对作物安全。

咯菌腈和抑霉唑均为作用机制较新颖的药剂，不同于常规使用的嘧霉胺、腐霉利、多菌灵，但生产中抑霉唑用于水果保鲜及番茄叶霉病防治，尚未正式用于灰霉病的防治，而咯菌腈登记来防治花卉作物灰霉病仅有1年时间，啶酰菌胺是应用于防治灰霉病的新型高效杀菌剂，引进近1年，并未普遍使用；福美双作为使用时间较长的多作用位点保护性杀菌剂，其抑菌作用仍出色，有望成为与咯菌腈、抑霉唑和啶酰菌胺等杀菌剂混配使用的拌药；吡唑醚菌酯虽然是甲氧基丙烯酸酯类新药剂，但对番茄灰霉病的防效较差；苯胺基嘧啶类杀菌剂嘧霉胺作为常规杀菌剂，曾经在灰霉病的防治中发挥重要作用，但在全国大部分地区产生抗性现象，已不适于防治番茄灰霉病。

本研究结果明确了咯菌腈可作为番茄灰霉病防治的首选药剂，抑霉唑和福美双可作为防治番茄灰霉病的有效药剂。田间使用50%咯菌腈可湿性粉剂防治时，建议使用剂量为90g／hm2，施药液量为900g／hm2。为了有效治理抗药性，延长药剂的使用寿命，抑霉唑、福美双、咯菌腈和啶酰菌胺在防治番茄灰霉病时应交替使用或混合使用。

［1］ 康立娟，张小风，王文桥，等.灰霉菌的抗药性与适合度测定［J］.农药学学报，2004（2）：39-42.

［2］ Kretschmer M，Hahn M.Fungicide resistance and genetic diversity ofBotrytis cinereaisolates from a vineyard in Germany［J］.Journal of Plant Diseases and Protection，2008，115（5）：214-219.

［3］ Myresiotis C K，Karaoglanidis G S，Tzavella-Klonari K.Resistance ofBotrytis cinereaisolates from vegetable crops to anilinopyrimidine，phenylpyrrole，hydroxyanilide，benzimidazole，and dicarboximide fungicides［J］.Plant Disease，2007，91（4）：407-413.

［4］ Moyano C，Gomez V，Melgarejo P.Resistance to pyrimethanil and other fungicides inBotrytis cinereapopulations collected on vegetable crops in Spain［J］.Journal of Phytopathology，2004，152（8／9）：484-490.

［5］ 马建英，张小风，王文桥，等.灰葡萄孢霉Botrytis cinerea对啶菌恶唑的敏感性和不同药剂的交互抗性［J］.植物保护学报，2009，36（1）：61-64.

［6］ 赵建江，李红霞，王文桥，等.番茄叶霉病菌对嘧菌酯的抗性检测及抗性风险评估［J］.华北农学报，2008，10（1）：47-52.

［7］ Birchmore R J，Forster B.FRAC methods for monitoring the sensitivity ofBotrytis cinereato anilinopyrimidine fungicides developed by the anilinopyrimidine fungicide resistance action committee of GIFAP［J］.EPPO Bulletin，1996，26：181-197.

Fungicidal activity of new fungicides againstBotrytis cinereaand their field efficacy against tomato grey mould

Chen Zhifang1，2， Wang Wenqiao2， Han Xiuying2， Zhang Xiaofeng2， Zhao Jianjiang2， Ma Zhiqiang2
（1.Department of Pesticide Science，College of Plant Protection，Agricultural University of Hebei，Baoding071001；2.IPM Centre of Hebei Province，Institute of Plant Protection，Hebei Academy of Agricultural ＆Forestry Sciences，Baoding071000，China）

Inhibitory activity of fludioxonil，imazalil，thiram，pyraclostrobin and pyrimethanil toBotrytis cinereawas tested by conidial germination test，mycelial growth rate test and cucumber cotyledons spray inoculation test，respectively.It was found that the inhibitory activity of fludioxonil was the highest both in conidial germination test and in mycelial growth rate test.Their EC50values were 0.005 2 and0.087 6μg／mL，respectively.The inhibitory activity of imazalil was the highest in cucumber cotyledons spray inoculation test，and its EC50value was 0.675 3μg／mL.The results of field efficacy trials showed that field efficacy of fludioxonil 50%WP was above 90%and obviously higher than that of the control fungicides，boscalid50%WG and pyrimethanil 40%SC，when the treatment concentrations were 90，300 or 480 g／hm2.

cucumber cotyledons spray inoculation test； fungicide；Botrytis cinerea； fungicidal activity；field efficacy trial

S 482.2

A

10.3969／j.issn.0529-1542.2011.05.039

2010-10-08

2010-11-11

公益性行业（农业）科研专项（200803074）；“十一五”国家科技支撑计划项目（2006BAD08A03）；河北省科技支撑计划（08220302D）

＊ 通信作者 Tel：0312-5915659；E-mail：wenqiaow＠163.com