万春和，黄 瑜，程龙飞, 傅光华, 施少华, 陈红梅

（福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福州 350013)

圆环病毒科（Circoviridae）包括2个属：圆圈病毒属（Gyrovirus）和圆环病毒属（Circovirus）。圆圈病毒属只有鸡贫血病毒（Chicken infectious anemia virus, CIAV）一个成员；而圆环病毒属目前有包括猪圆环病毒（Porcine circoviruses, PCV1 、PCV2）I型和II 型、鹦鹉喙羽病毒（Psittacine beak and feather disease virus, BFDV）[1]、鸽圆环病毒（Pigeon circovirus, PiCV）[2]、鹅圆环病毒（Goose circovirus,GoCV）[3]、鸭圆环病毒（Duck circovirus, DuCV）[4]、金丝雀圆环病毒(Canary circovirus,CaCV)[5]、渡鸦圆环病毒(Raven circovirus, RaCV)[6]、八哥圆环病毒（Starling circovirus，StCV）[7]、雀圆环病毒(Finch circovirus, FiCV)、鸥圆环病毒(Gull circovirus,GuCV)[8]和天鹅圆环病毒(Mute swans (Cygnus olor)circovirus, SwCV)[9]等。

鸽圆环病毒(GoCV)最早于1993年在美国报道[10]，此后在加拿大[11]、澳大利亚[12]、德国[2]、英国[3]、法国[13]、比利时[14]、意大利[15]和美国[16]均发现有感染报道。余旭平等[17,18]最早在中国浙江省检测到鸽圆环病毒感染，并对浙江省鸽圆环病毒的基因组结构进行分析。本文根据GenBank登录已发表的PiCV序列设计引物，对来自福建省某信鸽养殖厂送检病料进行PiCV检测，通过反向PCR技术获得全长基因序列，并进行生物信息学分析。

1 材料与方法

1.1 主要试剂蛋白酶K（Proteinase K）和十二烷基硫酸钠（SDS） 购自Sigma公司；DreamTaq Green PCR Master Mix购自Fermentas公司；DNA Marker（DL2000）和pMD18-T载体均购自宝生物工程（大连）有限公司；胶回收试剂盒、质粒纯化试剂盒均购自Omega；大肠杆菌DH5α感受态细胞自制。

1.2 病料处理及核酸提取参考文献[19]，实验病料为来自福建省某信鸽场，采集送检信鸽肝脏和脾脏。将组织以无菌PBS（pH 7.4）1: 5按常规方法匀浆后，反复冻融3次。提取鸽圆环病毒基因组DNA步骤：取1 mL组织匀浆液于室温10 000×g离心5 min，取540μL上清，加入60μL 10% SDS于37℃水浴作用30 min，加入15μL蛋白酶K（20 mg/mL），混匀后于56℃水浴作用2 h，间或摇匀。取出后分别置于95℃ 和-20℃各5 min后，加入等体积Tris饱和酚，混匀后静置15 min后，4℃ 12 000×g离心10 min。……