张家松 ，李卓佳 ，陈义平 ，文国樑 ，罗 亮 ，王奕玲 ，冷加华 ，曹煜成

（1. 中国水产科学研究院南海水产研究所，广东广州510300；2. 中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛266032）

WSSV自从1993年在日本首次报道以来，该病已经成为危害世界对虾养殖业最为严重的一种病毒性疾病。WSSV对养殖对虾是一种易传染、高致死性的病毒，养殖条件下可使感染对虾在3~10天内死亡，死亡率高达80~100%。感染对虾的主要症状是活力差、少食，濒死者体色变红，头胸甲往往出现直径0.5 mm~2 mm左右的白色斑点。IHHNV可引起凡纳滨对虾出现慢性“矮小残缺综合症”，患病对虾生长缓慢，表皮畸形，经济损失可达50%。临床上这2种病原混合感染现象很常见，并且感染了WSSV和IHHNV的对虾可终身带毒，通过垂直传播把病毒传给下一代和水平传播传给其他种群[1]。

本次调查，对广东沿海地区不同类型养殖池塘和养殖技术条件下的对虾进行采样检测，以了解养殖模式和养殖技术对WSSV和IHHNV流行感染状况的影响，希望为疾病的防治提供新的思路。

1 材料和方法

1.1 采样

2010年4月至12月间，随机选取广东沿海地区高位池精养、土池半精养和滩涂混养三种养殖模式中的17口池塘进行了采样，其中7口池塘在春夏和冬季的不同养殖季节进行了采样。每个池塘采样15尾，每5尾合并为一个样。

1.2 DNA提取

样品DNA提取按照海洋动物基因组提取试剂盒（天根生化科技（北京）有限公司）说明书进行，DNA样品-20 ℃保存备用。

1.3 WSSV感染的分子方法诊断

PCR采用杨卫帆[2]设计的套式PCR引物，可以同时检测WSSV和IHHNV，外引物扩增片段分别为988 bp和860 bp，内引物扩增片段分别为461 bp和344 bp。……