王佳斌，艾江平

(三亚市人民医院，海南三亚572000)

长期大剂量使用糖皮质激素的患者有可能出现激素性股骨头坏死，这在非创伤性股骨头坏死原因中位居第一［1，2］。骨保护素(OPG)和破骨细胞分化因子(RANKL)作为破骨细胞分化和调节骨吸收的关键因子，可直接影响破骨细胞功效，是骨质吸收的共同通路［3，4］。基质金属蛋白酶(MMP)及基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)主要影响机体各种组织的发育和修复。本研究观察了长期应用糖皮质激素致股骨头坏死患者骨组织中OPG、RANKL、MMP-1、MMP-2、TIMP的表达变化，探讨糖皮质激素性股骨头坏死的发病机制。

1 资料与方法

1．1 临床资料 2009年1月～2010年3月在本院接受手术治疗的自愿捐赠股骨头骨组织及骨髓的股骨颈骨折患者29例(对照组)及长期应用糖皮质激素(大剂量糖皮质激素冲击治疗超过1周，发病时正在接受糖皮质激素治疗超过3周或2 a内接受糖皮质激素治疗)致股骨头坏死患者30例(研究组)。对照组男18例、女11例，年龄43～68岁。研究组男20例、女10例，年龄42～67岁，排除酒精性、减压病等原因造成的股骨头坏死。本研究经本院伦理委员会讨论后批准。

1．2 标本采集及处理 对照组用小刮匙收集术中取出的股骨头松质骨，研究组小刮匙或骨穿针取股骨头松质骨，置4%多聚甲醛溶液固定。从两组患者大粗隆穿刺抽取骨髓10 ml，肝素抗凝，采用贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞(BMSCs):骨髓液中加高糖DMEM培养液，离心后弃上清，收集细胞;按1×109/L的标准接种于含15%FBS的高糖DMEM培养液，37℃、5%CO2培养箱培养;2 d后更换培养基，至培养第8～10天，收集BMSCs。……