范勇洪

作为膀胱舒缩活动的起搏和传导者，ICCs细胞在膀胱活动中起着关键作用［1］。其功能改变可能是造成膀胱功能障碍的原因。因此推测，DCP发病可能与ICCs改变有关。本研究通过单细胞培养、观察ICCs超微结构在高糖环境中的变化，探讨DCP功能改变的细胞生物学基础。

1 材料与方法

1.1 主要材料 英国种健康豚鼠，透射电镜。

1.2 方法

1.2.1 豚鼠膀胱ICCs细胞的体外培养和制备 脱臼处死豚鼠，无菌手术取出其膀胱，取肌层并剪成碎块，胶原酶V消化，制成无糖的DMEM细胞悬液于培养皿中，培养箱中培养24 h，弃去原液，分别加入5、10、15 mmol/L葡萄糖 DMEM 细胞培养液，继续培养24、72 h。胰蛋白酶消化，刮刀刮取ICCs细胞，高速离心，戊二醛固定细胞团。

1.2.2 电镜观察 细胞团经冲洗、固定、梯度序列丙酮浸泡脱水、聚合后，超薄切片，再醋酸铀、柠檬酸铅顺序染色后，切片置于透射电镜下，选图像清晰之ICCs细胞观察。

2 结果

ICCs细胞超微结构在高浓度糖环境中发生明显变化，随培养液中糖浓度升高及时间增长，ICCs细胞损害也就越明显。①5 mol组培养24和72 h组后，ICCs细胞无明显变化，镜下见核仁大而多，核浆比例大，线粒体丰富，胞突长而少。②10 mol组培养24 h则见核仁多，边集，核浆比例大，细胞内部细胞器减少，比如核糖体、内质网数量减少，内质网开始扩张，胞突变短，细胞内较多颗粒状类释放物存在，多位于胞突内，颗粒状物外有被膜。培养72 h后可见核仁大，数量多且形态不规则，核浆比例增大，细胞内部细胞器更少，细胞内颗粒状类释放物更多，位于胞突，并且有向外释放之势，胞突特别多且更短。……