侯志勇 王立强 梁振生

（1.解放军211医院，黑龙江哈尔滨150080；2.福建省泉州市华侨大学分子药物学研究所，福建泉州362021）

肾茶为肾茶属（Clerodendranthus）唇形科多年生草本植物 ，其雄蕊状如猫的胡须，故又称猫须草，全草入药。作为传统或民间药物已延续流传使用了几个世纪，用作治疗膀胱炎、肾炎、泌尿系统结石、动脉硬化、痛风、黄疸、感冒等疾病。传统医学认为其性味甘淡微苦、凉，具有清热去湿、排石利水的功效。福建医科大学附属第二医院在2008年收治三鹿奶粉致婴幼儿泌尿系统结石、肾脏损伤的患者时，就应用了该药并收到较好效果。目前已从肾茶中分离鉴定了近 200种化合物，包括黄酮及黄酮苷类、二萜类、酚类及多酚酸类、三萜类、精油及其他类成分，其中多酚类是肾茶叶子中最主要的成分，发挥肾茶的大部分药效作用。本文就肾茶提取物近年来的药理学研究进展综述如下。

1 治疗泌尿系统疾病

肾小球系膜细胞增殖是多数进展性肾小球疾病的核心病理表现，抑制系膜细胞的增殖，就可以控制肾小球疾病的进展，减少终末期肾脏病和移植肾衰竭的发生。肾小球系膜细胞增殖往往由炎症刺激引起，又会通过旁分泌和自分泌释放更多的炎症细胞因子，使炎症效应不断放大，形成放大效应。李月婷[1]用肾茶水煎剂处理原代培养的大鼠肾小球系膜细胞，肾茶在（50～250）μg/mL浓度范围内能够抑制血清或脂多糖刺激的肾小球系膜细胞增殖及脂多糖诱导的系膜细胞产生致炎因子IL-1β，抑制了系膜细胞增殖的放大效应。

研究表明，TGF-β在肾脏疾病发展中也起着重要的作用，能够引起肾小球系膜细胞外基质的积聚，2003年，Yoshimural[2]发现肾茶的水提和甲醇粗提取物能剂量依赖地抑制Bal/c 3T3细胞25I1-TGF-β与其受体的结合，随后分离鉴定出有效成分熊果酸和齐墩果酸，抑制25I1-TGF-β与其受体结合的IC50分别为（6.9±0.8）μM和（21.0±2.3）μM。利尿是治疗肾结石的重要方法。Arafat[3]研究了肾茶提取物的利尿和降低尿酸活性，发现大鼠口服甲醇/水（体积比1∶1）肾茶提取物（SEOS）能够增大尿量和加大Na+和K+的排出，与氢氯噻嗪的作用相当，并且与别嘌呤一样能够降低高尿酸小鼠的血液尿酸浓度。

以前研究表明，腺苷A1受体分布于肾脏的传入小动脉、肾小球、近端小管和集合管，腺苷A1受体拮抗剂能通过诱导利尿和钠的排泄来保护肾脏，2009年，Yuliana[4]从肾茶的提取物种分离出七种甲氧黄酮作为腺苷A1受体配体的Ki值在微摩尔范围，进一步阐明了肾茶作为腺苷A1受体拮抗剂利尿活性的分子作用机制。1972年，Fujimoto也曾发现MEOA中的肌醇起到了利尿的作用。

2 抗炎镇痛作用

Yam[5]发现，口服SEOS 500mg/kg或1000mg/kg能显著降低角叉菜胶致鼠足肿胀，在乙酸诱导的扭体实验和甲醛诱导的静脉指弹实验中显示出显著的止痛效果，但对甩尾测试和热板测试没有影响，这表明肾茶具有抗炎镇痛活性，而并没有镇静活性，推测肾茶可能是环氧合酶或/和脂氧合酶的抑制剂。

NO在致炎因子刺激下由某些细胞产生，通过破坏致病的DNA来保护正常组织，但过多的产生则导致组织损伤甚至脓毒性休克。因此，有效地抑制炎症刺激产生的NO积聚，是一种有益的治疗炎症反应的策略。2003年Awale[6，7]发现肾茶的甲醇提取物有显著的抑制NO产生的活性，进而分离甲醇提取物，从溶于CHCl3的部分分离出47个高氧合的isopimarane型骨架二萜和staminane型骨架二萜，所有这些二萜都分别具有抑制LPS活化的巨噬细胞样J774.1细胞产生NO的活性。

2010年，Chin[8]通过总多酚，Trolox等价抗氧化能力（TEAC，trolox equivalent antioxidant capacity），氧自由基清除能力（oxygen radical absorbance capacity）和细胞抗氧化能力（cellular antioxidant activity）测定分别评价了MEOA，肾茶乙醇提取物（EEOA）和肾茶水提取物的抗氧化活性，证实MEOA和EEOA的抗氧化活性较高，并且表明EEOA能最显著地抑制脂多糖刺激RAW 264.7鼠巨噬细胞产生NO，PEG2和ROS（活性氧簇），通过高效液相分析二者都有迷迭香酸和齐墩果酸，并且EEOA和迷迭香酸均能抑制脂多糖激发的RAW 264.7细胞中iNOS和COX-2 mRNA和蛋白的表达，这些结果表明，EEOA及其有效成分迷迭香酸通过降低ROS的产生及iNOS和COX-2基因的表达来抑制生成NO和PEG2。

由此可见，肾茶的二帖类、多酚类和黄酮类均具有抗炎活性，它们通过清除氧自由基、抑制iNOS和COX-2的表达从而减少NO和PEG2的产生等多条炎症相关途径阻止炎症的发生。

3 抗癌及化疗增敏作用

2000年，Tezuka[10]测定了肾茶地上部分的甲醇提取物对鼠肝转移结肠癌细胞26-L5的细胞毒性（ED50，73.6μg/mL），进一步分 离 出 溶 于 己 烷 部 分 （ED50，＞100μg/mL）， 氯 仿 部 分（ED50，76.2μg/mL），乙酸乙酯部分（ED50，82.4μg/mL），正丁醇（ED50，＞100μg/mL）和水溶部分（ED50，＞100 mg/mL），通过柱层层析和薄层层析分离活性较强的氯仿和乙酸乙酯部分，得到10种新型二帖和16种已知化合物，分别又检查了他们的26-L5细胞毒性，ED50值在（10～90）μg/mL范围内；接着又从氯仿部分分离到5种高度氧化二帖，norstaminone A和nororthosiphonolide A等[11]也都显示出微弱的肝转移结肠癌26-L5细胞毒性和HT-1080纤维肉瘤细胞毒性。

肿瘤化疗时，肿瘤细胞膜上P糖蛋白能依赖ATP将各种结构的化疗药包括阿霉素，长春新碱和放线菌素D等泵出细胞外，因此降低了胞内的药物积聚。2002年，Choi[12]发现肾茶中的成分橙黄酮能够剂量依赖地逆转P糖蛋白过表达细胞AML-2/D100对长春新碱的耐受，通过流式细胞仪检测到橙黄酮剂量依赖地增加了化疗药在细胞内的积聚，其化疗增敏作用比分别比5、7、30、40-四甲氧基黄酮和3，7-二羟基-30，40-二甲氧基黄酮强了10和18倍，而且不同于其他二代化疗增敏剂作为P糖蛋白的竞争性底物，药理剂量会产生很大的副作用，橙黄酮能够降低P糖蛋白的表达，在抑制浓度时不产生副作用。

4 抑制血管生成作用

目前抗血管生成已经成为治疗肿瘤等疾病的重要策略，而天然药物用于抗血管生成更是被视为一种理想的治疗策略。肾茶中含有较多的抗氧化和多酚类化合物，以往报道这类化合物具有抗血管生成作用，2009年，Sahib[13]等考查了肾茶的石油醚、氯仿、甲醇和水提取物的抑制血管生成活性，大动脉环实验测定（Aorta Ring Assay）得出甲醇提取部分具有最高的抑制血管生成活性（93.28±1.24）%，接着是氯仿部分，石油醚部分和水提部分，还发现甲醇部分具有清除DPPH自由基活性，IC50为0.286mg/mL。

5 肝脏保护作用

CCl4诱导的肝损伤模型通常用作肝脏保护药物的筛选，它在体内会被代谢成高活性的过氧化CCl4自由基，造成肝脏的过氧化损伤，ALT和AST也随之从肝脏进入血清。2007年，Mum[14]在实验中首先测定了SEOS清除DPPH自由基，抑制Fe＋诱导的脂质过氧化活性和TEAC，结果显示SEOS具有抗氧化，脂质过氧化抑制和自由基清除活性；接着通过CCl4诱导肝毒性，发现预先给予SEOS，可以剂量依赖地降低鼠肝坏死和抑制血清中的ALT和AST。表明SEOS可能是通过抗氧化和自由基清除活性来保护肝脏。

6 解热作用

发热反应机制是脑中PGE2浓度增高，连锁引起下丘脑控制体温调节的神经元冲动改变导致；大多数的解热药通过抑制环氧合酶的活性来降低下丘脑的PEG2水平，但近来认为解热药的活性还与减少致炎介质、增强抗炎信号或提高大脑解热信号相关。2009年，M.F.Yam[15]发现，SEOS对正常鼠体温没有影响，但在500mg/kg和1000mg/kg剂量给药后能够显著降低静脉注射酵母混悬液诱导的体温升高（由前列腺素生成引起），这种解热效果能够持续4h时，与扑热息痛（口服，150mg/kg）的药效相当；HPLC检测得到提取物中迷迭香酸，橙黄酮，佩兰素和四甲氧基黄酮分别占到7.58%，0.20%，0.34%和0.24%，其中迷迭香酸已被部分证实具有解热作用，作者推测SEOS解热主要是通过迷迭香酸抑制前列腺素的生成起作用。

7 抗黄疸作用

2009年，Faizul[16]将MEOA用于治疗黄疸小鼠，发现给药3d后胆红素显著降低到正常水平，特别是高剂量组（500和1250 mg/kg），降低胆红素水平分别从（2.44±0.12）到（0.52±0.12）mg/dL和从（2.67±0.29）到（0.32±0.21）mg/dL。作者认为，有可能是MEOA增加了葡萄糖醛酸转移酶活性从而促进胆红素在肝脏的结合反应，或者提高了胆红素和白蛋白的结合能力，或者其他机制。

8 小结与展望

目前肾茶的研究涉及到泌尿系统、心血管系统和消化系统等多个生理系统和多种疾病的治疗，药理作用研究已经比较全面，确证了肾茶作为传统药物在临床上的不同应用，而且毒性很小，使用安全，这为肾茶的开发利用奠定了良好的基础。

但是肾茶的研究还需更加深入，起药效的相应有效成分（部位）及比例的确认仍然模糊，后续的研究应借助现代分离检测手段，对起药效的粗提物进行更进一步地分离检测，对不同成分进行大量的药理药效实验，特别是体外实验（细胞、分子、受体、离子通道、基因等水平）的研究，判定出不同有效成分（部位）在肾茶治疗不同疾病时都起到什么作用，起多大作用，作用机制是什么；同时要关注肾茶不同成分（部位）在疾病治疗中的协同作用以及他们之间的比例，为准确地筛选出相应的有效部位和制定质量标准提供保证。

此外，肾茶的开发依旧停留在袋泡茶和简单的复方制剂水平，有效成分（部位）新药仍然是空白，随着肾茶有效成分（部位）分离纯化工艺的优化和相应药理学研究的深入，肾茶必将被开发成治疗肾脏及其他多种疾病的新药，以更高的疗效、更可控的质量服务人类健康。

[1]黄荣桂，郑兴中，李月婷.肾茶对肾小球系膜细胞增殖及白细胞介素 1β 表达的影响[J].中国中西医结合肾病杂志，2003，4（10）：571-573.

[2]Yoshimura H，Sugawara K，Saito M，et al.In vitro TGF-beta1 antagonistic activity of ursolic and oleanolic acids isolated from Clerodendranthus spicatus.[J].Planta Med，2003，69（7）：673-675.

[3]Arafat OM，Tham SY，Sadikun A，et al.Studies on diuretic and hypouricemic effects of Orthosiphon stamineus methanol extracts in rats[J].J Ethnopharmacol，2008，118（3）：354-360.

[4]Yuliana ND，Khatib A，Link-Struensee AM，et al.Adenosine A1 receptor binding activity ofmethoxy flavonoids from Orthosiphon stamineus[J].Planta Med，2009，75（2）：132-136.

[5]Yam MF，Asmawi MZ，Basir R.An investigation of the anti-inflammatory and analgesic effects of Orthosiphon stamineus leaf extract[J].J Med Food，2008，11（2）：362-368.

[6]Awale S，Tezuka Y，Banskota AH，et al.Inhibition of NO production by highly-oxygenated diterpenes of Orthosiphon stamineus and their structure-activity relationship[J]. Biol Pharm Bull，2003，26 （4）：468-473.

[7]Awale S，Tezuka Y，Banskota AH，et al.Highly-oxygenated isopimarane-type diterpenes from Orthosiphon stamineus of Indonesia and their nitric oxide inhibitory activity[J].Chem Pharm Bull（Tokyo），2003，51（3）：268-275.

[8]Hsu CL，Hong BH，Yu YS，et al.Antioxidant and anti-inflammatory effects of Orthosiphon aristatus and its bioactive compounds[J].J A-gric Food Chem，2010，58（4）：2150-2156.

[9]Yam MF，Lim V，Salman IM，et al.HPLC and anti-inflammatory studiesofthe flavonoid rich chloroform extractfraction ofOrthosiphon stamineus leaves.[J].Molecules，2010，15（6）：4452-4466.

[10]Tezuka Y，Stampoulis P，Banskota AH，et al.Constituents of the Vietnamese medicinal plant Orthosiphon stamineus[J].Chem Pharm Bull（Tokyo），2000，48（11）：1711-1719.

[11]Awale S，Tezuka Y，Banskota AH，et al.Norstaminane-and isopimarane-type diterpenes of Orthoshohon stamineus from Okinawa[J].Tetrahedron，2002，58（27）：5503-5512.

[12]Choi CH SKAC.Reversal of P-glycoprotein-mediated multidrug resistance by 5，6，7，3'，4'-pentamethoxyflavone（sinensetin）[J].Biochemical and Biophysical Research Communications，2002，295（4）：832-840.

[13]Sahib H，Aisha A，Yam ME.Anti-Angiogenic and Anti Oxidant Properties of Orthosiphon stamineus Benth.Methanolic Leaves Extract[J].International Journal of Pharmacology，2009，5（2）：162-167.

[14]Yam MF，Basir R，Asmawi MZ，et al.Antioxidant and hepatoprotective effects of Orthosiphon stamineus Benth.standardized extract[J].Am J Chin Med，2007，35（1）：115-126.

[15]Yam MF，Ang LF，Basir R，et al.Evaluation of the anti-pyretic potential of Orthosiphon stamineus Benth standardized extract.[J].Inflammopharmacology，2009，17（1）：50-54.

[16]Faizul F，Aminudin N，Kadir HEA.Bilirubin lowering potential of Orthosiphon stamineus in temporarily jaundiced adult rats[J].African iournal of Pharmacy and Pharmacy，2009，3（7）：359-360.