董 飞 陈运起 刘世琦 高莉敏 王传增

（1山东农业大学园艺科学与工程学院，山东泰安 271018；2山东省农业科学院蔬菜研究所，山东省设施蔬菜生物学重点实验室，国家蔬菜改良中心山东分中心，山东济南 250100）

大葱（Allium fistulosumL.）为百合科葱属二年生草本植物。我国栽培利用大葱的历史逾3 000 a，现全国各地均有栽培（周光华，1999）。近年来，随着分子生物技术的迅速发展和基因工程的日趋普及，利用转基因植株生产药物、疫苗和生物制剂愈加展示出广阔的应用前景和潜在的经济效益。在转基因植株的研究中，无菌苗的筛选和培育是试验成功的关键，而无菌苗一般由种子获得，因此，种子有效消毒显得尤为重要。迄今，各种灭菌方法报道颇多（Sommer et al.，1981；Dodds & Roberts，1996；Pierik，1997；吴良欢和陶勤南，1997，1999；杨岚 等，2008），但是有关大葱种子消毒的方法鲜有报道。本试验以大葱种子为材料，设计不同的消毒方法，观察记录大葱种子始发期、发芽率、发芽势及污染率，为大葱种子的有效消毒提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

以山东省农业科学院蔬菜研究所提供的章丘大葱种子为试材。次氯酸钠、升汞、吐温20等药剂购自济南凯莱生物技术有限公司。

1.2 种子消毒处理

种子消毒处理方法：每个处理200粒种子，先将大葱种子用自来水冲洗30 min，然后置于超净工作台上用75%酒精漂洗0.5～1.0 min，转入消毒液中进行消毒处理，最后用无菌水冲洗3～5遍，接种于MS培养基。

种子消毒试验设计：① 2%次氯酸钠消毒20 min；② 2%次氯酸钠消毒40 min；③ 2%次氯酸钠消毒60 min；④ 0.1%升汞消毒5 min；⑤ 0.1%升汞消毒10 min；⑥ 0.1%升汞消毒15 min。……