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发酵液中替考拉宁含量的HPLC法测定

2011-08-13张波

中国实用医药 2011年23期
关键词:检测

张波

替考拉宁(Teicoplanin)为新型糖肽类抗生素,抗菌谱及抗菌活性与万古霉素相似,对金黄色葡萄球菌的作用比万古霉素更强,不良反应更少。本品对革兰阳性菌如葡萄球菌、链球菌、肠球菌和大多厌氧性革兰阳性菌敏感,具有较强的杀菌活性。由于替考拉宁独特的作用机制,很少出现耐替考拉宁的菌株,所以对青霉素类及头孢菌素类,大环内酯类、四环素类和氯霉素类,氨基糖苷类和利福平耐药的革兰阳性菌,仍对替考拉宁敏感[1,2]。本文采用高效液相色谱法,乙腈-磷酸盐体系作为流动相,对发酵液中的替考拉宁含量测定方法进行研究,结果满意。

1 仪器与试剂

Waters1525型液相色谱仪(美国Waters公司),UV100型紫外检测器,替考拉宁对照品(中国药品生物制品检定所提供),替考拉宁样品(山东鲁抗医药股份有限公司);乙腈(色谱纯,天津四友公司)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为磷酸盐缓冲液(pH=6.0)-乙腈(75∶25),流速1.0 ml/min,检测波长为 254 nm,进样量 10 μl。

2.2 检测波长的选择 对替考拉宁对照品的流动相溶液进行紫外扫描,结果在254 nm附近有较大吸收,在此波长处发酵液无明显干扰,故选择254 nm作为检测波长。

2.3 标准溶液的配制 精密称取替考拉宁对照品约20 mg,置10 ml容量瓶中,振摇,用流动相溶解至刻度,作为供试品溶液,另取替考拉宁样品适量,同法操作。

2.4 系统适用性试验 取10 μl对照品溶液注入液相色谱仪,记录色谱图。在该色谱条件下,替考拉宁峰与其他杂质峰分离度大于1.2。

2.5 破坏性试验 称取替考拉宁对照品……

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