徐云生 倪开志

冰冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。由于其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。但在冰冻切片制作过程中，影响制片的质量因素较多，从而影响手术中的快速病理诊断。因此，快速制作一张高质量的冰冻切片对于确保病理诊断极其重要。其中固定是冰冻切片制作中关键步骤之一，对切片的制片质量有着重要的影响。本文通过6种不同固定液短时固定对冰冻切片制片染色的比较，探讨不同固定液对冰冻切片制片效果的影响。

1 资料与方法

1.1 材料 选自楚雄州人民医院病理科手术切除的新鲜组织标本40例，包括有乳腺、甲状腺、胃、子宫、卵巢等组织。

1.2 固定液 6种固定液分别为：10%福尔马林;95%酒精;AF固定液;丙酮∶甲醇∶乙醚酒精(乙醚∶酒精1∶1)。

1.3 方法

1.3.1 取材及切片 取材大小为1.5 cm×1.5 cm，厚2～3 mm的新鲜组织，用OCT包埋剂包埋后，放进徕卡恒温冷冻切片机(温度-18℃ ～20℃)，1～2 min后，每例标本连续切片各6张，厚度4～5 μm。

1.3.2 固定及染色 切片后立即放进上述6种不同的固定液(室温20～25℃)固定6 s。将固定过的切片用蒸馏水洗30 s，放进改良的GILL苏木素液(预先放在65°恒温水域箱加热)2 min，自来水洗，1%盐酸酒精分化液分化10 s，温水(50℃)蓝化30 s，伊红染色30 s，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

2 结果

切片制作好后，通过对6种不同固定液的对比，在显微镜下观察切片的组织清晰度、细胞收缩度、细胞核染色、细胞浆染色、核浆对比情况。结果见表1。

表1 6种不同固定液的对比