CD14mRNA的表达在急性脑出血肠-肝轴紊乱中的作用及星蒌承气汤的干预研究
2011-08-09赵海滨唐杰马立华王威王帅张秀静
赵海滨,唐杰,马立华,王威,王帅,张秀静
急性脑出血是神经系统多发病和常见病,可引起一系列内分泌功能紊乱,严重可导致全身炎症反应综合征(systemicinflammatoryresponsesyndrome,SIRS),或多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)。急性脑出血时,肠黏膜屏障受损,通透性增加,细菌易位,形成肠源性内毒素血症,最终导致肝损害;随着肝损害的进一步加重,肝脏对内毒素清除能力下降,加重内毒素血症。两者互为因果,恶性循环。脑出血急性期多表现为“痰热腑实证”,发在颅内(上),治在胃肠(下),清热通腑化痰是临床常用治法。本研究旨在既往急性脑出血模型研究的基础上,阐述肝、肠系膜淋巴结CD14表达的动态变化在急性脑出血应激性肝损害中的作用及星蒌承气汤的干预效应。
1 材料与方法
1.1 动物及分组 成年健康雄性SD大鼠88只,体重(220±20)g,由北京中医药大学实验动物中心提供。采用随机数字表法将大鼠分为正常组(A组,n=24)、单纯脑出血组(B组,n=24)、脑出血痰热腑实证组(C组,n=24)和星蒌承气汤组(D组,n=16)。其中A、B、C组分24 h、48 h、72 h 3个时间亚组,D组分48 h、72 h两个时间亚组,每个时间亚组各8只。
1.2 实验材料 星蒌承气汤颗粒剂由北京康仁堂中药有限公司提供;总RNA抽提试剂Trizol由Invitrogen公司提供,5×SYBR Green PCR Master Mix由AB Applied Biosystems公司提供;dNTP由Solarbio公司提供;OligodT、Rnasin、M-MLA由Promega公司提供;引物由北京奥科鼎盛生物科技有限公司合成;采用Agilent Technologies stratagene M×3000 P荧光定量仪。
1.3 方法
1.3.1 动物模型制作 A组:不予造模处理,正常饮食。B组:复制脑出血模型[1-2]。用1%戊巴比妥钠40mg/kg腹腔麻醉,俯卧固定于动物头颅立体定位仪上。根据大鼠大脑立体定位图谱,调整立体定向仪使门齿沟平面比耳间线平面低2.4mm,此时前囟和后囟基本上在同一平面上;……
