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超高效液相色谱-串联质谱法检测猪血清中泰乐菌素残留的建立

2011-08-08李艳华

东北农业大学学报 2011年9期
关键词:血清检测

崔 阳,王 冰,徐 刚,边 栋,李艳华*

(1.东北农业大学动物医学学院,哈尔滨 150030;2.东北农业大学食品学院,哈尔滨 150030)

泰乐菌素是一种畜禽专用大环内酯类抗生素,作为促进生长用的添加剂在国内养猪业中已广泛应用。在我国,泰乐菌素仍然属于限制使用的药物饲料添加剂。然而2006年欧盟成员国全面禁止使用抗生素作为促生长剂。但对于活体动物出口的检疫,无法采用动物组织或脏器直接测量,因而进行血液中泰乐菌素含量的测量来标示泰乐菌素在体内组织中的残留情况。到目前为止,我国尚无有关猪血清中泰乐菌素残留的可靠分析方法。报道的检测大环内酯类的方法主要有高效液相色谱法[1-2]、气/质联用法[3]、液/质联用法(LC/MS或LC-MS/MS)[4-10]。

本试验采用超高效液相色谱串联三重四级质谱(UPLC-MS/MS)技术对血清样品中的泰乐菌素进行分析。克服了血清取样量小的限制,且MS具有高灵敏度、高选择性的特点,可以在极低的浓度下进行精确的定量,因此本试验可以对血清中微量泰乐菌素进行快速鉴别和测定,同时也对泰乐菌素在猪体内的药物代谢动力学研究提供了检测方法。猪血清中泰乐菌素的检测限达到0.2 ng·mL-1,回收率及精密度结果满意。猪血清中泰乐菌素的检测方法,作者未见文献报道。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

1.1.1 试剂与标准品

甲醇-HPLC级(Dimammd),乙腈-HPLC级(Fisher),泰乐菌素标准品(Sigma),乙酸、乙酸铵-分析纯(科密欧),SEP-Vac C18固相萃取柱3 mL,200mg填料(Waters),去离子水(Milli-Q),5种不同来源的空白血清样品(香坊试验猪场)。

1.1.2 仪器

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